Μέθοδος και εφαρμογή διαμόρφωσης απομονωτών pH 10 Tromethamine Tris

Τα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα Tris αποθηκεύουν τη μέθοδο και την εφαρμογή διαμόρφωσης

Το κινεζικό όνομα προϊόντων Tris είναι tris (hydroxymethyl) aminomethane tromethamine tromethamine 2 αμινο-2 (hydroxymethyl) - 1,3-propanediol. Είναι ένα άσπρη κρύσταλλο ή μια σκόνη. Διαλυτή ουσία στην αιθανόλη και νερό, ελαφρώς διαλυτό στο αιθυλικό οξικό άλας και το βενζόλιο, διαβρωτικά στο χαλκό και το αργίλιο, και τις ενοχλώντας χημικές ουσίες.

Το Tris έχει μια υψηλή ρυθμιστική ικανότητα, υψηλή διαλυτότητα στο νερό, και είναι αδρανές σε πολλές ενζυματικές αντιδράσεις, που κάνουν Tris έναν πολύ ικανοποιητικό απομονωτή για πολλούς βιοχημικούς λόγους. Γενικά χρησιμοποιημένος για να σταθεροποιήσει το pH του συστήματος αντίδρασης, με μια ισχυρή αποθηκεύοντας ικανότητα μεταξύ του pH 7.5-9.0.

Τα πλεονεκτήματα Tris αποθηκεύουν:

①Επειδή η βάση Tris είναι ιδιαίτερα αλκαλική, αυτό το σύστημα απομονωτών μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να προετοιμάσει τους απομονωτές με ένα ευρύ φάσμα των τιμών pH που κυμαίνονται από όξινο ως αλκαλικό

②Έχει λίγη παρέμβαση στη βιοχημική διαδικασία, και δεν κατακρημνίζει με το ασβέστιο, τα ιόντα μαγνήσιου και τα ιόντα βαρύ μετάλλου.

Τα μειονεκτήματα Tris αποθηκεύουν:

①Το pH του απομονωτή επηρεάζεται πολύ από τη συγκέντρωση της λύσης, ο απομονωτής είναι αραιωμένος δέκα φορές, και η αλλαγή pH είναι μεγαλύτερη από 0,1

②Η επίδραση θερμοκρασίας είναι μεγάλη, και η αλλαγή θερμοκρασίας έχει μια μεγάλη επιρροή στην αξία pH του ρυθμιστικού διαλύμματος, △pKa/℃=-0.031, παραδείγματος χάριν: το pH του ρυθμιστικού διαλύμματος σε 4℃=8.4, έπειτα το pH=7.4 σε 37℃, έτσι αυτό πρέπει να είναι προετοιμάζεται στη θερμοκρασία της χρήσης. Ο απομονωτής tris-HCL που προετοιμάζεται στη θερμοκρασία δωματίου δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε 0℃~4℃

③Είναι εύκολο να απορροφηθεί το CO2 στον αέρα, έτσι ο έτοιμος απομονωτής πρέπει να σφραγιστεί στενά

④Αυτός ο απομονωτής έχει μια ορισμένη επίδραση παρέμβασης σε μερικά ηλεκτρόδια pH, έτσι ένα ηλεκτρόδιο συμβατό με τη λύση Tris πρέπει να χρησιμοποιηθεί.

Μέθοδος διαμόρφωσης απομονωτών Tris:

Υπάρχουν δύο τρόποι να προετοιμαστεί ο απομονωτής tris-HCL: προετοιμάστε 0,05 mol/L Tris και 0,05 λύσεις HCL mol/L αντίστοιχα, και έπειτα το μίγμα σύμφωνα με τους όγκους που απαριθμούνται στον κοινό πίνακα. Εντούτοις, επειδή η τυποποιημένη συγκέντρωση του αραιού υδροχλωρικού οξέος δεν είναι εύκολο να προετοιμαστεί, μια άλλη μέθοδος χρησιμοποιείται συνήθως: Πάρτε τη διαμόρφωση 1 Λ 0,1 απομονωτής tris-HCL mol/L για παράδειγμα: αρχικά ζυγίστε τη βάση 12,11 γ Tris και διαλύστε 950 στο εξιοντισμένο μιλ. νερό mL~970, ανακατώνοντας, προσθέστε το HCL 4 Ν dropwise, χρησιμοποιήστε έναν μετρητή pH για να μετρήσετε την αξία pH της λύσης στην επιθυμητή αξία pH, και προσθέστε έπειτα το νερό για να κάνετε μέχρι 1 Λ.

Σειρά απομονωτών pH Tris:

Ο απομονωτής Tris είναι ένας ευρέως χρησιμοποιημένος απομονωτής στη βιοχημική έρευνα. Η συνήθως χρησιμοποιημένη αποτελεσματική σειρά pH της είναι στη «ουδέτερη» σειρά, όπως:

Απομονωτής tris-HCL: pH=7.5~8.5

Απομονωτής tris-φωσφορικού άλατος: pH=5.0~9.0

Εφαρμογή του ρυθμιστικού διαλύμματος Tris:

Στον απομονωτή ηλεκτροφόρησης, διαμορφώνει ένα σύστημα απομονωτών με τη γλυκίνη για να σταθεροποιήσει το pH χρησιμοποιεί το σύστημα απομονωτών tris-HCL στο πήκτωμα για να σταθεροποιήσει το pH χρησιμοποιείται ευρέως ως διαλύτης για τα νουκλεϊνικά οξέα και τις πρωτεΐνες η χαμηλή ιοντική δύναμη του απομονωτή Tris μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για nematodes το σχηματισμό των ενδιάμεσων ινών προσθέστε EDTA στον απομονωτή υδροχλωρικού οξέος Tris για να κάνετε το «απομονωτή TE», ο οποίος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη σταθεροποίηση και την αποθήκευση DNA αλλάξτε το διάλυμα οξέος pH-ρύθμισης στο οξικό οξύ για να λάβετε το «απομονωτή TAE», το αντικαταστήστε με το βορικό οξύ είναι διαθέσιμος ως απομονωτή TBE. Αυτοί οι δύο απομονωτές χρησιμοποιούνται συχνά στα πειράματα ηλεκτροφόρησης νουκλεϊνικού οξέος.