Cyclohexylamine ΚΑΛΥΜΜΆΤΩΝ CAS 1135-40-6 οξύ Propanesulfonic στο πείραμα

Cyclohexylamine τα propanesulfonic όξινα ΚΑΛΥΜΜΑΤΑ είναι μια συνήθως χρησιμοποιημένη βιοχημική πρώτη ύλη. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως θεραπεύοντας πράκτορας για τις ροές, desiccants, και τα βασισμένα στο νερό ισοκυανικά άλατα στα επιστρώματα. Στη βιοχημική βιομηχανία, χρησιμοποιείται συνήθως ως βιολογικός απομονωτής. Σύμφωνα με το περιεχόμενό της αγνότητας και ακαθαρσιών, η βιομηχανία εφαρμογής είναι επίσης διαφορετική.

Από την άποψη της μοριακής δομής, τα ΚΑΛΥΜΜΑΤΑ είναι ένα N-substituted sulfamic οξύ κυκλοεξανίου με ένα μοριακό βάρος 221,32 και επαμφοτερίζοντα. Είναι ένας πολύ καλός βιολογικός απομονωτής με μια σειρά απομονωτών pH 9.7-11.1. Χρησιμοποιείται συνήθως για τα πειράματα WB. Ο απομονωτής για την πρωτεϊνική μεμβράνη μεταφοράς PVDF ή nitrocellulose NC μεταφέρει τη μεμβράνη.

Στάσεις WB για το δυτικό πρωτεϊνικό immunoblotting πείραμα λεκέδων. Η αρχή είναι να χρωματιστούν τα κύτταρα ή τα βιολογικά δείγματα που αντιμετωπίζονται από την ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων με τα συγκεκριμένα αντισώματα, και να ληφθεί η έκφραση των συγκεκριμένων πρωτεϊνών στα αναλυθε'ντα κύτταρα ή των ιστών με την ανάλυση της θέσης και του βάθους του χρωματισμού. Πληροφορίες. Οι πειραματικές σημειώσεις είναι οι ακόλουθες:

Αντιδραστήριο ΚΑΛΥΜΜΑΤΩΝ

1. Sds-ΣΕΛΙΔΑ ηλεκτροφόρηση: παρόμοια με το νουκλεϊνικό οξύ η μέθοδος υβριδοποίησης, εκτός από το ότι ανιχνευμένη είναι η πρωτεΐνη, ο έλεγχος είναι το αντίσωμα, και το χρωματισμένο δευτεροβάθμιο αντίσωμα ονομάζεται. Κατά γενική ομολογία, το σύστημα τρι-γλυκερίνης ή απομονωτών tris-Tricine χρησιμοποιείται για χαμηλό - πρωτεΐνες μοριακού βάρους, και το σύστημα απομονωτών είναι καλύτερο για τις πρωτεΐνες μοριακού ψηλού βάρους. Η γλυκίνη στον απομονωτή έχει επιπτώσεις στην αλληλοuχία, έτσι ο απομονωτής μεταφοράς που χρησιμοποιείται για την αλληλοuχία είναι μεθανόλη 10mM/1CAPS10%. Η συγκέντρωση της μεθανόλης στα ΚΑΛΥΜΜΑΤΑ που ο απομονωτής είναι 0-20%. Γενικά, ένας απομονωτής με μια υψηλή συγκέντρωση μεθανόλης έχει μια καλή επίδραση μεταφοράς στις low-molecular-weight πρωτεΐνες, ενώ ένας απομονωτής με μια χαμηλή συγκέντρωση μεθανόλης ή ακόμα και καμία μεθανόλη είναι καλός για τις πρωτεΐνες μοριακού ψηλού βάρους. Μεταφορά.

2. Όταν η μεμβράνη PVDF υποβάλλεται σε επεξεργασία, την ενυδατώστε στη μεθανόλη για λίγα δευτερόλεπτα, και βάλτε έπειτα αυτό μέσα ο electroimprinting απομονωτής. Οι διαδικασίες συνέχειας πρέπει να αποτρέψουν τη μεμβράνη από το στέγνωμα. Εάν η μεμβράνη PVDF γίνεται ξηρά, επαναλάβετε τα προηγούμενα βήματα. Το πήκτωμα ηλεκτροφόρησης πρέπει επίσης να ενυδατωθεί στον απομονωτή ΚΑΛΥΜΜΑΤΩΝ για 5-10 λεπτά. Μερικές έντονα βασικές πρωτεΐνες δεν χρειάζονται αυτό το βήμα.

3. Οι όροι μεταφοράς είναι συνήθως σταθερή τάση 50V, τρέχουσα ένταση 100-170mA, και electroimprint μεταφορά στη θερμοκρασία δωματίου. Οι φυσαλίδες μεταξύ του πηκτώματος και της μεμβράνης PVDF πρέπει να αφαιρεθούν. Για τις πρωτεΐνες με το μεγαλύτερο μοριακό βάρος, δώστε την προσοχή για να παρατείνετε το χρόνο μεταφοράς.

4. Πρίν βάφει, η μεμβράνη PVDF πρέπει να ληφθεί έξω και να ξεπλυθεί με το εξιοντισμένο νερό, που ενυδατώνεται στη μεθανόλη, κατόπιν που βάφεται με 0,1% λαμπρό μπλε Coomassie για 30-50 δευτερόλεπτα, που αποχρωματίζονται με τη μεθανόλη 50%, που πλένεται με το εξιοντισμένο νερό και ξηρός.

Τα ανωτέρω εισάγουν μερικά θέματα που χρειάζονται την προσοχή στο πρωτεϊνικό πείραμα αποτύπωσης. Εκτός από το ίδιο το πείραμα, η τεχνολογία Desheng υπενθυμίζει σε σας ότι για τη Ασφάλεια και Υγεία, παρακαλώ φορέστε τα εργαστηριακά ενδύματα και τα μίας χρήσης γάντια ένδυσης για τη λειτουργία. Τα ΚΑΛΥΜΜΑΤΑ ηλεκτρο-που αποτυπώνουν τον απομονωτή συστήνονται για να παραχθούν από Desheng τη διαμόρφωση του υψηλής ποιότητας cyclohexylamine propanesulfonic οξέος.