Ο εστέρας ακριδίνης μπορεί να ανιχνεύσει τη ζημία DNA που προκαλείται από τη φορμαλδεΰδη και την ακεταλδεΰδη!

Πολλοί εξωγενείς και ενδογενείς παράγοντες, όπως οι περιβαλλοντικοί ρύποι, η ιονίζουσα ακτινοβολία, η χημειοθεραπεία με φάρμακα και ο μεταβολισμός των κυττάρων, μπορούν να προκαλέσουν διάφορες μορφές βλάβης του DNA.Οι σπασμοί διπλής ράχνης του DNA προκαλούν τη σοβαρότερη βλάβη στη σταθερότητα του γονιδιώματος και μπορούν να απειλήσουν την επιβίωση των κυττάρωνΗ καθιέρωση μιας απλής, ταχείας και ευαίσθητης μεθόδου για την ανίχνευση των επιπτώσεων της υβριδικοποίησης του DNA και της γονιδιοτοξικότητας είναι ένα πολύ σημαντικό ερευνητικό θέμα.Εδώ είναι μια σύντομη εισαγωγή στη μέθοδο ανίχνευσης βλάβης στο DNA.

Ποια είναι τα είδη ανίχνευσης βλάβης στο DNA

Οι μέθοδοι ανίχνευσης βλάβης του DNA περιλαμβάνουν την ηλεκτροφορέση με τζελ, την υπεριώδη φασματοφωτομετρία, τη φθορά και την ηλεκτροχημεία και την ανάλυση χημειοφωτισμού.Η ανάλυση χημειοφωτισμού (CL) έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στους τομείς του περιβάλλοντος και των επιστημών της ζωής λόγω της υψηλής ευαισθησίας τηςΤο φόρμαλδεΰδη και η ακεταλδεΰδη είναι και τα δύο περιβαλλοντικά ρύπαντα.Μελέτη της ποσότητας των εστέρων ακριδινίου που ενσωματώνονται στο DNA πριν και μετά τη βλάβη της φορμαλδεΰδης και της ακεταλδεΰδης, προκαλώντας αλλαγές στην ένταση χημειοφωτισμού των εστέρων ακριδινίου, και μελετώντας τη συμπεριφορά βλάβης της φορμαλδεΰδης και της ακεταλδεΰδης στο DNA.Καθορισμός μιας απλής μεθόδου ανάλυσης χημειοφωτισμού για την αξιολόγηση του βαθμού βλάβης του DNA που προκαλείται από τη φορμαλδεΰδη και την ακεταλδεΰδη.

Μέθοδος εστέρων ακριδίνης για την ανίχνευση περιβαλλοντικής βλάβης στο DNA

1Πρώτα, το γυάλινο κύτταρο φωτεινής ακτινοβολίας που χρησιμοποιείται βυθίζεται σε μια ορισμένη ποσότητα συμπυκνωμένου νιτρικού οξέος για αρκετές ώρες, οξύνεται και στη συνέχεια ξεπλένεται με νερό.Προστίθενται 20 μL DNA του θύμου του μοσχαριού 1 mg/mL στο όξινο κύτταρο φωτισμού, και τοποθετήστε το για 1 ώρα για να κάνει το DNA να απορροφηθεί στο κάτω μέρος της φωτεινής πισίνας,και στη συνέχεια το μη προσυμπληρωμένο DNA του θύμου του μοσχαριού πλένεται με δευτερογενές νερό για να αποκτήσει τη φωτεινή πισίνα με προσυμπληρωμένο DNA.

2. Προσθέστε 50μL 9,6×10-7g/mlεστέρας ακριδινίουΗ αντίδραση χημειοποίησης είναι για 1 ώρα για να ενσωματώσει το AE στη διπλή δομή DNA και να ξεπλύνει το αχημικό AE με δευτερογενές νερό.στο φωτεινό κύτταρο Προσθέστε αντιδραστήρες εκκίνησης φωτεινής ακτινοβολίας σε ακολουθία για τον εντοπισμό της χημειοφωτεινής ακτινοβολίας που παράγεται από AE χημειωμένο στο DNAΌταν ανιχνεύεται η βλάβη του DNA του θυμού του μοσχαριού από φορμαλδεΰδη και ακεταλδεΰδη, προστίθεται αντιδραστήρας βλάβης στο DNA μετά την αναισθητική χημειοποίηση και χρησιμοποιείται μετά από ένα ορισμένο χρονικό διάστημα.Το δεύτερο νερό ξεπλένει την ΑΕ που απελευθερώνεται μετά την βλάβη του DNA., και προστίθεται το αντιδραστήριο εκκίνησης φωτεινότητας για την ανίχνευση της έντασης χημειοφωτεινότητας της χιμερικής AE στο DNA.

Μελέτες έχουν δείξει ότι ο εστέρας ακριδινίου μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως δείκτης χημειοφωτισμού με καλή δομή διασταυρούμενης διπλής έλικας DNA.Αυτή η μέθοδος ανίχνευσης είναι εφικτή για βλάβη διάσπασης του DNA και μέθοδο ανίχνευσης χημειοφωτισμούΟι εστέρες ακριδίνης ντεσένγκ έχουν τις ιδιότητες της καλής υδρολυτικής σταθερότητας.θερμική σταθερότητα και υψηλή αναλογία σήματος-θόρυβου, και οι συνθήκες επισήμανσης είναι ήπιες, ο ρυθμός επισήμανσης είναι υψηλός και ο διαχωρισμός δεν επηρεάζει τον διαχωρισμό μετά την επισήμανση. Ως εκ τούτου, θεωρείται ιδανικός χημικός δείκτης.