Ο εστέρας ακριδίνης μπορεί να ανιχνεύσει τη ζημία DNA που προκαλείται από τη φορμαλδεΰδη και την ακεταλδεΰδη!

Οι διάφοροι εξωγενείς και ενδογενείς παράγοντες, όπως οι περιβαλλοντικοί ρύποι, η ακτινοβολία ιονισμού, η χημειοθεραπεία φαρμάκων, και ο μεταβολισμός κυττάρων, μπορούν να προκαλέσουν τις διάφορες μορφές ζημίας DNA. Μεταξύ τους, τα σπασίματα διπλός-σκελών DNA έχουν την περισσότερη σοβαρή ζημιά στη σταθερότητα γονιδιώματος και μπορούν να απειλήσουν την επιβίωση των κυττάρων. Η καθιέρωση μιας απλής, γρήγορης και ευαίσθητης μεθόδου για τα αποτελέσματα DNA της υβριδοποίησης και γενοτοξικότητας είναι ένα πολύ σημαντικό ερευνητικό θέμα. Εδώ είναι μια συνοπτική εισαγωγή στη μέθοδο ανίχνευσης ζημίας DNA.

Αυτό που είναι οι τύποι ανιχνεύσεων ζημίας DNA

Οι μέθοδοι ανίχνευσης ζημίας DNA περιλαμβάνουν την ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων, την υπεριώδη φασματομετρία, το φθορισμό και την ηλεκτροχημεία, και chemiluminescence την ανάλυση. Chemiluminescence η ανάλυση (CL) έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στους τομείς του περιβάλλοντος και των βιολογικών επιστημών λόγω της υψηλής ευαισθησίας της, την ευρεία γραμμική σειρά, την κατάλληλη λειτουργία, τη γρήγορη ανάλυση, και την εύκολη αυτοματοποίηση. Η φορμαλδεΰδη και η ακεταλδεΰδη είναι και οι δύο περιβαλλοντικοί ρύποι. Σε κάποιο βαθμό, μπορεί να προκαλέσει τη ζημία DNA. Μελετήστε το ποσό εστέρων acridinium που ενσωματώνονται στο DNA πριν και μετά από τη ζημία της φορμαλδεΰδης και της ακεταλδεΰδης, προκαλώντας τις αλλαγές στη chemiluminescence ένταση των εστέρων acridinium, και μελετήστε τη συμπεριφορά ζημίας της φορμαλδεΰδης και της ακεταλδεΰδης στο DNA. Καθιερώστε μια απλή chemiluminescence μέθοδο ανάλυσης για να αξιολογήσετε το βαθμό ζημίας DNA που προκαλείται από τη φορμαλδεΰδη και την ακεταλδεΰδη.

Μέθοδος εστέρων ακριδίνης για τη ατμοσφαιρική ρύπανση στο DNA

1. Κατ' αρχάς, ενυδατώστε το luminescence γυαλιού κύτταρο που χρησιμοποιείται σε ένα συγκεκριμένο ποσό του συγκεντρωμένου νιτρικού οξέος για αρκετές ώρες, ξινίστε, και έπειτα ξέβγαλμα με το νερό. Προσθέστε 20 μL του DNA θύμων αδένων μόσχων 1mg/mL στο ξινισμένο luminescence κύτταρο, και το τοποθετήστε γιατί 1 ώρα για να κάνει το DNA προσροφάται στο κατώτατο σημείο της εκπέμπουσας φως λίμνης, και έπειτα το DNA θύμων αδένων μόσχων πλένεται με το δευτεροβάθμιο νερό για να λάβει την εκπέμπουσα φως λίμνη με το DNA που προσροφήθηκε.

2. Προσθέστε 50μL του εστέρα acridinium 9.6×10-7g/mL στο luminescent κύτταρο, και η αντίδραση chimerization είναι για 1h να ενσωματωθεί το AE στη double-stranded δομή DNA, και να πλυθεί μακριά το unchimeric AE με το δευτεροβάθμιο νερό. Τέλος, στο luminescent κύτταρο προσθέστε ότι luminescence τα αντιδραστήρια έναρξης για να ανιχνεύσουν στη σειρά chemiluminescence που παρήχθη από το AE στο DNA. Κατά την ανίχνευση της ζημίας του DNA θύμων αδένων μόσχων από τη φορμαλδεΰδη και την ακεταλδεΰδη, προσθέστε το αντιδραστήριο ζημίας στο DNA μετά από το chimerization AE, και το χρησιμοποιήστε μετά από μια ορισμένη χρονική περίοδο. Το δεύτερο νερό πλένει μακριά το AE που απελευθερώνεται αφότου βλάπτεται το DNA, και το luminescence αντιδραστήριο έναρξης προστίθεται για να ανιχνεύσει τη chemiluminescence ένταση του AE ουτοπικού στο DNA.

Οι μελέτες έχουν δείξει ότι ο εστέρας acridinium μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως chemiluminescence δείκτης με μια καλή δομή της παρεμβολής του διπλού έλικα DNA. Αυτή η μέθοδος ανίχνευσης είναι εφικτή για τη ζημία σπασιμάτων DNA και chemiluminescence τη μέθοδο ανίχνευσης. Έχει τα πλεονεκτήματα της απλότητας και της ευαισθησίας. Οι μελέτες ζημίας παρέχουν μια απλή ερευνητική μέθοδο. Οι luminescent δείκτες εστέρα ακριδίνης Desheng έχουν τις ιδιότητες της καλής υδρολυτικής σταθερότητας, της θερμικής σταθερότητας και της υψηλής σήματος προς θόρυβο αναλογίας, και οι όροι μαρκαρίσματος είναι ήπιοι, το ποσοστό μαρκαρίσματος είναι υψηλό, και ο χωρισμός δεν έχει επιπτώσεις στο χωρισμό μετά από να ονομάσει. , Έτσι θεωρείται ένας ιδανικός χημικός δείκτης.