Η ηλεκτροφόρηση νουκλεϊνικού οξέος DNA είναι ένα σημαντικό βήμα PCR νουκλεϊνικού οξέος, το χωρισμό και τον καθαρισμό, την ανίχνευση νουκλεϊνικού οξέος και άλλες δοκιμές. Η εξάρτηση ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων αγαρόζης είναι ένα προϊόν εξαρτήσεων ηλεκτροφόρησης που αναπτύσσεται για να διευκολύνει την ηλεκτροφόρηση νουκλεϊνικού οξέος. Έναντι του παραδοσιακού πηκτώματος η ηλεκτροφόρηση έχει πολλά πλεονεκτήματα.
Πήκτωμα αγαρόζης, ρευστό ηλεκτροφόρησης και απομονωτής φόρτωσης
Η ηλεκτροφόρηση αναφέρεται στη μετακίνηση των χρεωμένων μορίων προς ένα ηλεκτρόδιο απέναντι από τις ηλεκτρικές ιδιότητές τους στο πλαίσιο της δράσης ενός ηλεκτρικού πεδίου. Υπό ορισμένες προϋποθέσεις, το κινούμενο ποσοστό (κινητικότητα) χρεωμένων μορίων καθορίζεται. Στην ηλεκτροφόρηση DNA ή τη νότια υβριδοποίηση λεκέδων λεκέδων, χρέωσε ότι τα μόρια αναφέρονται στο DNA νουκλεϊνικού οξέος, και διαφορετικό DNAs έχει τις διαφορετικές κινητικότητες και χωρίζει έτσι μεταξύ τους. Δεδομένου ότι τα μόρια νουκλεϊνικού οξέος είναι πολύ ευαίσθητα στο pH, ένας απομονωτής πρέπει να προστεθεί στη λύση ηλεκτροφόρησης στα νουκλεϊνικά οξέα. Τα τμήματα απομονωτών περιλαμβάνονται στη λύση ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων, TAE ή TBE αγαρόζης, φορτώνοντας τον απομονωτή.
Γενικά, η ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων αγαρόζης πρέπει να περάσει από τα ακόλουθα βήματα: προετοιμασία του πηκτώματος ηλεκτροφόρησης αγαρόζης, προετοιμασία της λύσης ηλεκτροφόρησης, επισήμανση, ηλεκτροφόρηση, και καθαρισμός της δεξαμενής ηλεκτροφόρησης. Μεταξύ τους, ο πιό μακροχρόνιος χρόνος είναι η προετοιμασία του πηκτώματος αγαρόζης. Πρέπει να προετοιμάσει μια λύση μίξης, να ζυγίσει το αγαρόζη, να λειώσει σε έναν φούρνο μικροκυμάτων, να δροσίσει τη λύση σε 60 βαθμούς, να χύσει το πήκτωμα που δροσίζει, και που καθαρίζει τον εξοπλισμό. Η διαδικασία είναι πολύ δυσκίνητη, και επαναλαμβανόμενος σε μεγάλες ποσότητες, παίρνει 1 ~ 1,5 ώρες. Η εξάρτηση ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων αγαρόζης είναι διαφορετική:
1. Δεν υπάρχει καμία ανάγκη να αγοραστούν τα αντιδραστήρια όπως το αγαρόζη, η χρωστική ουσία νουκλεϊνικού οξέος, η λύση ηλεκτροφόρησης και ο απομονωτής φόρτωσης.
2. Αποβάλτε το cumbersomeness της παραγωγής του πηκτώματος, και το προ-γίνοντα πήκτωμα είναι προ-λεκιασμένο με τις χρωστικές ουσίες νουκλεϊνικού οξέος, καμία ανάγκη για τη λύση ηλεκτροφόρησης που λεκιάζει ή μετα-που λεκιάζει. Απλός και κατάλληλος, έτοιμος να χρησιμοποιήσει. Καμία ανάγκη να προστεθεί τον η χρωστική ουσία νουκλεϊνικού οξέος στα δείγματα DNA ή τη λύση ηλεκτροφόρησης κατά χρησιμοποίηση του προ-γίνονταυ πηκτώματος, που μειώνει τα απόβλητα των χρωστικών ουσιών νουκλεϊνικού οξέος, και εξαιρετικά - η χαμηλή τοξικότητα των προ-λεκιασμένων πηκτωμάτων είναι πολύ ασφαλέστερη για τους χειριστές από άμεσα τις χρωστικές ουσίες νουκλεϊνικού οξέος χρήσης.
3. Η εξάρτηση είναι εξοπλίζω ειδικά με λύση υψηλής τη γρήγορη ηλεκτροφόρησης. Εάν το τεμάχιο δειγμάτων νουκλεϊνικού οξέος σας είναι κάτω από 2000bp, μπορείτε να ελέγξετε την ταχύτητα της ηλεκτροφόρησης ανά πάσα στιγμή και να ρυθμίσετε την τάση. Το γενικό μίνι πήκτωμα μπορεί να ολοκληρωθεί σε 5-10 λεπτά στο γρηγορότερο Τα δείγματα δεικτών ή νουκλεϊνικού οξέος έχουν πολλά ζώνες και μακροχρόνια τεμάχια (τα τεμάχια δειγμάτων νουκλεϊνικού οξέος είναι μεγαλύτερα από 2000bp), που μπορούν να προσαρμοστούν σε μια κατάλληλη χαμηλή τάση, ή εσείς μπορεί ακόμα να χρησιμοποιήσει τους αρχικούς χαμηλής τάσης όρους ηλεκτροφόρησής σας.
4. Η ηλεκτροφόρηση αυτού του προϊόντος δεν έχει επιπτώσεις στην επόμενη νότια υβριδοποίηση, και τα αποκτηθε'ντα τεμάχια DNA υποβάλλονται στην αποκατάσταση πηκτωμάτων, και επόμενο ligation DNA και άλλες αντιδράσεις δεν επηρεάζονται.
Εν ολίγοις, έναντι της παραδοσιακής μεθόδου ηλεκτροφόρησης νουκλεϊνικού οξέος, η προκατασκευασμένη αγαρόζη εξάρτηση ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων έχει πλεονέκτημα χρόνο, που σώζουν την εργασία, υψηλή πίεση, γρήγορη, και που κερδίζουν κόστος. Είναι ένα προϊόν που συστήνεται έντονα από Desheng. Φυσικά, υπάρχει TAE, εξαρτήσεις ηλεκτροφόρησης TBE ή απομονωτής Tris ή άλλοι απομονωτές μπορούν επίσης να έρθουν σε επαφή με την επιχείρησή μας.
