Εφαρμογή του ethanesulfonic οξέος hydroxyethylpiperazine 4 (HEPES) στην ανίχνευση ιών λύσσας

4-υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθανουσουλφονικό οξύ, αγγλική συντομογραφίαΤαμείο ασφαλείας HEPES, αριθμός CAS: 7365-45- 9, χρώμα λευκή κρυσταλλική σκόνη, τιμή PH 6, 8- 8.2, η πιο συνηθισμένη εφαρμογή του είναι ως βιολογικό buffer προσαρμογή της τιμής PH και η εφαρμογή του σε προϊόντα φροντίδας του δέρματος είναι επίσης αγαπημένη από τους μεγάλους κατασκευαστές.Η εφαρμογή του στην ανίχνευση του ιού της λύσσας είναι συχνά άγνωστηΣήμερα, ο συντάκτης του Desheng θα δημοσιοποιήσει σχετικές γνώσεις για όλους.

Ο ιός της λύσσας γενικά δεν παράγει κυτοπαθητικό (CPE) όταν αναπαράγεται σε μολυσμένα κύτταρα και δεν είναι εύκολο να σχηματιστούν πλάκες υπό συμβατικές συνθήκες καλλιέργειας.Αν και πολλοί μελετητές στο σπίτι και στο εξωτερικό έχουν καθιερώσει την διάβρωση του ιού λύσσας στα κύτταρα εμβρύου κοτόπουλου και στα κύτταρα BHK-21Οι μέθοδοι εντοπισμού, όμως, απαιτούν αυστηρές πειραματικές συνθήκες, ή οι εργασίες είναι περίπλοκες και δύσκολες για να τις κατανοήσουμε, γεγονός που επηρεάζει τη δημοτικοποίησή τους και τη χρήση τους.Αφού οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι το 4-υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθανόσουλφονικό οξύ HEPES μπορεί να ενισχύσει την παθογόνο επίδραση του ιού της λύσσας στα μολυσμένα κύτταρα, χρησιμοποίησαν αυτό το χαρακτηριστικό του HEPES για να καθιερώσουν μια απλή και γρήγορη μέθοδο HEPES πλάκας για τον ιό λύσσας.

Η επίδραση του HEPES στη δημιουργία πλάκας του ιού της λύσσας

Αφού τα μολυσμένα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε θερμοκρασία 37°C για 3 έως 5 ημέρες, τα μολυσμένα κύτταρα που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με HEPES παρουσίασαν εμφανείς κυτοπατικές αλλαγές στον πυθμένα του κάλυψης.Μετά από χρωματισμό με κρυστάλλινο μωβΔεν παρατηρήθηκε κυτταροπαθητική επίδραση και δεν παρατηρήθηκε σχηματισμός πλάκας.Μπορεί να παρατηρηθεί ότι το HEPES μπορεί προφανώς να προωθήσει το σχηματισμό πλάκας του ιού της λύσσας στα κύτταρα BHK..

Παρατήρηση σχετικά με την ευαισθησία της μεθόδου HEPES για την πλάκα

Η μέθοδος της πλάκας HEPES μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον τίτλο της ιογενούς λοίμωξης.Τα πειράματα δείχνουν ότι υπάρχει προφανής σχέση τιτρού μεταξύ του αριθμού των πλάκας που σχηματίζονται μετά τη λοίμωξη από ιό και της αραίωσης του ιού.Οι μολυσματικοί τίτλοι του ίδιου στελέχους του ιού της λύσσας CTN-BHK μετρήθηκαν με τη μέθοδο της πλάκας HEPES και τη μέθοδο του ποντικιού.Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο αριθμός των πλάκας που λαμβάνονται με τη μέθοδο HEPES για 4 διαδοχικές μετρήσεις κυμαινόταν από 1 έως 5Ο τίτλος μόλυνσης που λαμβάνεται με τη μέθοδο ποντικιού για 4 διαδοχικούς προσδιορισμούς είναι 6,0·6,8log ή 1,0·10·6,3·10/ml.Αυτό δείχνει ότι η ταχεία μέθοδος HEPES έχει την ίδια ευαισθησία με τη μέθοδο του ποντικιού..

Πλεονεκτήματα της μεθόδου HEPES πλάκας

Χρησιμοποιώντας το στέλεχος του ιού της λύσσας CTN-181 και το στέλεχος CTN-BNK για τη μελέτη της μεθόδου τιτλοποίησης του τιτλοποιητή μόλυνσης,τα αποτελέσματα δείχνουν ότι το HEPES μπορεί να προκαλέσει και να ενισχύσει την παθογόνο δράση του ιού των σκύλων στα μολυσμένα κύτταραΌταν ο ιός μολύνει τα κύτταρα, καλλιεργούνται σε θερμοκρασία 37°C για 3°5 Απλώς προσθέστε 50°00mmol/L HEPES στο κάλυμμα με μεθυλοκυτταρίνη σε ημισφαιρικό μέσο την πρώτη μέρα.χρώμα με κρυστάλλινο βιολετί διάλυμα μετά από 24 ώρες, και υπολογίζεται ο αριθμός των πλακών με γυμνό μάτι μετά την ξήρανση σε θερμοκρασία δωματίου.Αυτή η μέθοδος πλάκας έχει τα πλεονεκτήματα της ταχείας, απλό, οικονομικό, ευαίσθητο και εύκολο να το μάθει κανείς.

Το HEPES που παράγεται από την Desheng είναι αντιδραστήρα ποιότητας με καθαρότητα μεγαλύτερη από 99%.ΝτεσένγκΕάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις ή ανάγκες, μπορείτε να πάτε στην επίσημη ιστοσελίδα για να συμβουλευτείτε το προσωπικό εξυπηρέτησης πελατών