Εφαρμογή των ΚΑΛΥΜΜΑΤΩΝ (CAS 1135-40-6) στο πρωτεϊνικό Transmembrane πείραμα

Εισαγωγή

ΠΑΡΑΓΜΑΤΙΚΑ, 3- ((cyclohexylamine) 1-propanesulfonic acid, οργανική χημική ουσία, λευκή κρυσταλλική σκόνη, CAS1135-40-6, είναι ένα βιολογικό απόσβεση, που χρησιμοποιείται συνήθως σε βιοχημικά διαγνωστικά κιτ,Συσκευές εκχύλισης DNA/RNA και συσκευές διάγνωσης PCRΤο buffer για τη χημεία των ενζύμων και τον διαχωρισμό βασικών φαρμάκων με HPLC χρησιμοποιείται ευρέως στη διαδικασία μεταφοράς μεμβράνης της αλληλουχίας πρωτεϊνών.ΠΑΡΑΓΜΑΤΙΚΑτο απόθεμα ασφαλείας αποτελείται απόΠΑΡΑΓΜΑΤΙΚΑΤο φυτικό νερό, το αποιονισμένο νερό κλπ., και το pH του ρυθμίζεται σε 11,0 για τον καθαρισμό της ιβορεκτίνης.

Ταμείο ασφαλείας CAPS

Βασικά σημεία λειτουργίας

1Ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE: σύμφωνα με τις συμβατικές συνθήκες (σύστημα CAPS: για πρωτεΐνες > = 20kD, σύστημα Tris Tricine: για πρωτεΐνες χαμηλού μοριακού βάρους, επίσης για πρωτεΐνες υψηλού μοριακού βάρους);

2. συγκέντρωση μεθανόλης: το εύρος συγκέντρωσης μεθανόλης στο buffer ηλεκτροτυπίας CAPS είναι 0-20% (η συγκέντρωση μεθανόλης είναι υψηλή, χρησιμοποιείται για τη μεταφορά πρωτεϊνών χαμηλού μοριακού βάρους·η συγκέντρωση μεθανόλης είναι χαμηλή ή δεν περιέχει καν μεθανόλη, χρησιμοποιείται για τη μεταφορά πρωτεϊνών υψηλού μοριακού βάρους) ·

3Επεξεργασία μεμβράνης PVDF: αφαιρέστε την μεμβράνη PVDF, βουτήξτε την σε μεθανόλη για αρκετά δευτερόλεπτα και στη συνέχεια τοποθετήστε την στο buffer ηλεκτρονικής διάλυσης CAPS (Σημείωση:η μεμβράνη PVDF δεν πρέπει να στεγνώνει μετά τη λειτουργία τηςΕάν η μεμβράνη είναι στεγνή, επαναλάβετε τη λειτουργία αυτού του βήματος.

4. Επεξεργασία με τζελ: αφαιρέστε το τζελ και βουτήξτε το σε tampon CAPS για 5-10 λεπτά. (Σημείωση: αυτό το βήμα μπορεί να παραλειφθεί κατά τη μεταφορά ορισμένων ισχυρών βασικών πρωτεϊνών PI > 9.0) ·

5. Εγκαταστήστε τη θέση μεταφοράς: βυθίστε το χαρτί φίλτρου και το σφουγγάρι στο ηλεκτροφωτιστικό tampon, στη συνέχεια πιέστε το σάντουιτς ηλεκτρικής εκτύπωσης με τη σειρά του σφουγγαριού, του χαρτιού φίλτρου, του φιλμ PVDF, του τζελ,Χαρτί φίλτρου και σφουγγάρι, και τοποθετήστε το σε μια μικρή ηλεκτρική περιστρεφόμενη θέση.

6Οι συνθήκες μεταφοράς: μεταφορά σε σταθερή πίεση 50V (100-170 MA) σε θερμοκρασία δωματίου για 0,5-2h. (Σημείωση: αποστράγγιση των φυσαλίδων μεταξύ του τζελ και του φιλμ PVDF.η πρωτεΐνη άνω των 70 KD πρέπει να μεταφέρεται για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα);

7. Προεπεξεργασία της βαφής μεμβράνης PVDF: αφαιρέστε την μεμβράνη PVDF και ξεπλύντε την με αποιονισμένο νερό, βάψτε την σε μεθανόλη για αρκετά δευτερόλεπτα, στη συνέχεια βαφίστε την

8. Χρωματισμός μεμβράνης: χρωματισμός με μπλε λάμψη Coomassie (διαλύει το R-250 με 0,1% μπλε λάμψη Coomassie σε 40% μεθανόλη/1% οξικό οξύ) για 30-50 δευτερόλεπτα (όχι περισσότερο από 1 λεπτό),αποχρωματισμός με 50% μεθανόλη (αλλάξτε συχνά το αποχρωματιστικό διάλυμα), πλύνεται πλήρως με αποιονισμένο νερό και κατόπιν στεγνώνεται·

ΓΑΠΣ προετοιμασία απόσβεσης

1. 10×CAPS(100mmol/L) διαλύμα tampon παρασκευάζεται ως εξής: CAPS, 22,13g. προσθέστε αποιονισμένο νερό σε 900ml. ρυθμίστε την τιμή pH σε 11,0 με 2mol/L NaOH (περίπου 20ml), στη συνέχεια αραιώστε σε 1L και αποθηκεύστε σε θερμοκρασία 4°C.

2Το ηλεκτροτυπωτικό απόσβεσμα CAPS (1 × CAPS που περιέχει 10% μεθανόλη) παρασκευάζεται με τις ακόλουθες μεθόδους: 200 ml 10 × CAPS, 200 ml μεθανόλης, 1600 ml αποιονισμένου νερού.

Άλλες εφαρμογές

ΠΑΡΑΓΜΑΤΙΚΑχρησιμοποιείται επίσης για την κατασκευή υλικών συγκόλλησης, εξοπλισμού κλιματισμού και πρώτων υλών για την κατασκευή· χρησιμοποιείται επίσης για την κατασκευή πυροτεχνικών προϊόντων· χρησιμοποιείται ως αναλυτικό αντιδραστήριο,φορείς ανταλλαγής θερμότητας, και χρησιμοποιείται επίσης στη φαρμακευτική βιομηχανία· χρησιμοποιείται για κλιματισμό, πυροτεχνία, ξηρές μπαταρίες· χρησιμοποιείται επίσης ως ρεύμα και ξηραντικό·Χρησιμοποιείται για την απομάκρυνση υδατικού ισοκυανικού στην βιομηχανία βαφήςΗ εταιρεία Desheng ειδικεύεται στην έρευνα και ανάπτυξη και την παραγωγή διαφόρων βιολογικών αποσβεστικών, συμπεριλαμβανομένων των CAPS, Tris, Bicine, MOPS κλπ. με υψηλή καθαρότητα ≥ 99%, σταθερή διαδικασία,καλωσορίζουν τις επιχειρήσεις και τα άτομα για περαιτέρω διαβουλεύσεις.