Chromogen το υπόστρωμα ΟΛΟΚΛΗΡΩΝΕΙ τον προσδιορισμό των βημάτων ελεύθερου λιπαρού οξέος

Ο προσδιορισμός του ελεύθερου λιπαρού οξέος (FFA) στον ορό είναι ένας σημαντικός βιοχημικός δείκτης δοκιμής και ο FFA συνδέεται στενά με την ανθρώπινη υγεία.Επειδή τα συστατικά του ορού είναι πολύπλοκα και υπάρχουν πολλοί τύποι FFA, η ανίχνευση επηρεάζεται από πολλούς παράγοντες, έτσι το υπόστρωμα χρωμογόνουΠάνωχρησιμοποιείται συνήθως για τον προσδιορισμό της FFA.

Αντιδραστήρας TOPS υποστρώματος χρωμογόνου

Δοκιμαστικό μέτρο για την ανίχνευση του χρωμογόνου

1Στο δοχείο, προσθέστε πρώτα το διαλύμα-απόσβεση που ζυγίζεται σύμφωνα με την αναλογία του τύπου, και στη συνέχεια προσθέστε ATP, συνένζυμο A, 4- αμινοαντιπυρίνη, ενεργοποιητή ιόντων (χλωριούχο μαγνήσιο), σταθεροποιητή (BSA),και συντηρητικό στη σειράΜετά την προσθήκη της κατάλληλης ποσότητας νερού, προσθέστε επιφανειοδραστικό, ρυθμίστε το pH στο pH 6-9 με συμπυκνωμένο υδροχλωρικό οξύ, προσθέστε επιτέλους ακυλο- CoA συνθεάση, στη συνέχεια ανακινήστε και φιλτράρετε.και προσθέστε αποσταγμένο νερό στο φίλτρο για να λάβετε αντιδραστήρα Α ποσοτικά.

2. Προσθέστε απόσβεση στο δοχείο, στη συνέχεια προσθέστε χρωμογόνο TOPS, νερό, επιφανειακά δραστικό με τη σειρά του, ρυθμίστε το pH σε pH 6-9, τελικά προσθέστε HRP και ακετυλοοξειδάση CoA, στη συνέχεια αναμιγνύετε και φιλτράρετε,και στη συνέχεια προστίθεται αποσταγμένο νερό στο προκύπτον φίλτρο σε ποσοτική ποσότητα, λαμβάνεται αντιδραστήρας Β.

3. Γεμίστε τα παραπάνω αντιδραστήρια σε φιαλίδια και αποθηκεύστε τα σε θερμοκρασία 2- 8°C. Πάρτε το αντιδραστήρα Α και το δείγμα και ανακατέψτε τα σε μια ορισμένη αναλογία, επώασε για ένα ορισμένο χρονικό διάστημα,και διαβάζουμε την τιμή απορρόφησης A1; προστίθεται το αντιδραστήριο Β και αναμιγνύεται ομοιόμορφα, εκκολάπτεται για ορισμένο χρονικό διάστημα και διαβάζεται η τιμή απορρόφησης Α2.

Προετοιμάστε το απόθεμα ασφαλείας:

Σε ένα καθαρό γυάλινο δοχείο, προστίθεται αρχικά απόσβεση HEPES (απόσβεση Good, απόσβεση zwitterionic, συμπεριλαμβανομένων των HEPES, Tris, MES, MOPS κλπ.) η οποία έχει ζυγιστεί σύμφωνα με τον λόγο του τύπου,προσθέστε την κατάλληλη ποσότητα νερού, και στη συνέχεια προσθέστε επιφανειακά δραστικό 5 ml/ L TritonX-100, χρησιμοποιήστε συμπυκνωμένο υδροχλωρικό οξύ για να ρυθμίσετε το pH στο pH 6- 9, η ποσότητα είναι περίπου 5 ml/ L, στη συνέχεια ανακατέψτε και φιλτράρετε,και στη συνέχεια προστίθεται απόστακτο νερό στο παραγόμενο φίλτρο σε ποσοτική ποσότητα.

Η μέθοδος χρήσης των TOPS ωςΥπόστρωμα χρωμογόνουγια την ανίχνευση του ορού ή του πλάσματος, το FFA έχει υψηλή ακρίβεια και μικρό σφάλμα μέτρησης, και είναι το πιο κατάλληλο χρώμα μεταξύ των πολλών χρωμογόνων του Trinder, το οποίο είναι χαμηλό σε ακετυλοκωαλίνη, υψηλή σταθερότητα,και μεγάλος συντελεστής απορρόφησης από τα μολάριαΕκτός από το TOPS, τα χρωμογόνα υποστρώματα που παράγει η Desheng περιλαμβάνουν το TOOS, το MAOS, το ADPS κλπ., τα οποία είναι κατάλληλα για την ανίχνευση του σακχάρου στο αίμα και άλλων βιοχημικών δεικτών.