Συνήθως χρησιμοποιούνται τα TAE, τα οποία περιέχουν Tris, ακετάτη και EDTA, και TBE (Tris-borate-EDTA).
Όταν ένα ηλεκτρικό ρεύμα περνά μέσα από το νερό, το νερό που περιέχεται στο νερό είναι αδιάβροχο.μια αντίδραση οξείδωσης συμβαίνει στην άνοδο για την παραγωγή ιόντων οξυγόνου και υδρογόνουΗ μακροχρόνια ηλεκτροφορέση καθιστά το ασύρματο αγωγό και το αγωγό αλκαλικό.Ένα καλό σύστημα αποθήκευσης θα πρέπει να έχει ισχυρή ικανότητα αποθήκευσης για να διατηρεί το pH του διαλύματος στους δύο πόλους ουσιαστικά σταθερόΜια άλλη λειτουργία του αποθηκών ηλεκτροφόρησης είναι να κάνει το διάλυμα να έχει μια ορισμένη αγωγιμότητα για να διευκολύνει τη μετανάστευση των μορίων DNA.Το DNA είναι μια αλκαλική ουσία που φορτίζεται αρνητικά κατά τη διάρκεια της ηλεκτροφορέσης (αποθέτης pH = 8) και μεταναστεύει από το αρνητικό ηλεκτρόδιο στο θετικό ηλεκτρόδιο.
Ένα άλλο συστατικό του αποθέτη ηλεκτροφόρησης είναι η EDTA, ο σκοπός της οποίας είναι η χηλίωση του πλάσματος Mg2 + και η αποτροπή της ενεργοποίησης της DNase κατά τη διάρκεια της ηλεκτροφόρησης.Το EDTA μπορεί να κρατήσει αυτά τα ιόντα σταθερά για να αποφευχθεί η αποδόμηση του νουκλεϊκού οξέοςΑλλά πρέπει να σημειωθεί ότι τα ιόντα μαγνησίου είναι επίσης συν-παράγοντες πολλών ενζύμων, όπως τα ένζυμα περιορισμού, οι πολυμερές DNA, κλπ.Έτσι η συγκέντρωση του EDTA γενικά δεν είναι πολύ υψηλή (συνήθως γύρω στο 1mM).
ΝτεσένγκΚωδός ασφαλείας TRISσυσκευασία
Έτσι, ποια είναι καλύτερη, TAE ή TBE; Στην πραγματικότητα, ποια θα πρέπει να χρησιμοποιήσω για την ηλεκτροφορέση DNA; Εξαρτάται πραγματικά από τον σκοπό του πειράματος σας.
1Η αγωγιμότητα του TBE είναι μεγαλύτερη από εκείνη του TAE.Η TBE συνιστάται για μακροχρόνια ηλεκτροφόρηση..
2Το βορικό οξύ είναι ένας αναστολέας των ενζύμων, οπότε εάν χρειάζεται να διαχωριστεί το ηλεκτροφορήση DNA για την αντίδραση πέψης, συνιστάται να χρησιμοποιηθεί το TAE ως διάλυμα-απόσβεση ηλεκτροφορήσεως.
3Για τα θραύσματα μικρότερα από 300bp, η ταχύτητα μετανάστευσης στο TBE είναι ταχύτερη σε ένα τζελ αγαρόζης 2%.
4Τα θραύσματα μεγαλύτερα από 2kb μεταναστεύουν ταχύτερα στο TAE (σε 0,8% τζελ αγαρόζης), και η ταχύτητα είναι περίπου 10% ταχύτερη από ό, τι στο TBE.Το TAE είναι πιο κατάλληλο για την ανάκτηση των αποσπασμάτων DNA.Σε σύγκριση με το TBE, το TAE έχει υψηλότερη ανάλυση για το υπερστροφικό DNA.
Συνοπτικά, το ζήτημα του αν η TBE ή η TAE είναι καλύτερη δεν μπορεί να γενικευθεί.Το βιολογικό απόθεμα που αναπτύχθηκε από την Desheng έχει ευρύ φάσμα απόθεμα.Το σύστημα μπορεί να προετοιμάσει απόσβεση με ένα ευρύ φάσμα τιμών pH, και μπορεί να παρέχει διάφορες προδιαγραφές συσκευασίας.Καλώς ήρθατε για να συμβουλευτείτε και να αγοράσετε.