Comparison of chemiluminescence and fluorescent substrates of HRP in enzyme-linked immunoassay

Το πιο συνηθισμένο ενζυματικό παρασκεύασμα που χρησιμοποιείται στην ενζυματική ανοσοθεραπεία είναι η υπεροξειδάση χοιρινού κρέατος HRP. Υπάρχουν τρεις τύποι υποστρωμάτων στη βιοχημική ανίχνευση, και υπάρχουν κυρίως τρεις τύποι,συγκεκριμένα χρωμογόνα υποστρώματα όπωςΠΟΥΣΜεταξύ αυτών, τα υποστρώματα χημειοφωτισμού χρησιμοποιούνται επίσης στην ανάλυση χημειοφωτισμού,που γίνεται όλο και πιο δημοφιλής..

Είτε πρόκειται για υπόστρωμα χρωμογόνου, είτε για υπόστρωμα φθορισμού ή χημειοφωτισμού, χρησιμοποιείται ως μέθοδος σήμανσης και ανίχνευσης,που διαδραματίζει βασικό ρόλο στην ακρίβεια και την ευαισθησία του αποτελέσματος ανίχνευσηςΗ πιο δημοφιλής είναι η ανάλυση της ανοσίας με χημειοφωτισμό.

Λουμινόλη σε σκόνη

Η ανάπτυξη διαφόρων υποστρωμάτων σε βιοχημικές δοκιμές:

Όσον αφορά τον χρόνο ανάπτυξης της μεθόδου ανίχνευσης, το φθοριούχο υπόστρωμα είναι το προϊόν της υπεροξειδάσης που αναπτύχθηκε μετά το χρωμογόνο υπόστρωμα,και η ευαισθησία ανίχνευσης είναι υψηλότερη από εκείνη του υποστρώματος χρωμογόνουΠολλά φθοριστικά υλικά διαφορετικών χρωμάτων μπορούν να χρησιμοποιηθούν ταυτόχρονα. , αλλά ο εξοπλισμός είναι ακριβός, το κόστος ανίχνευσης είναι υψηλό και παρεμβαίνει εύκολα από την αυτοφθορά που παράγεται από κύτταρα ή άλλα μόρια,και είναι ευαίσθητο στο φως και ασταθές κατά την παρατήρηση και την αποθήκευσηΜετά τα φθοριούχα υποστρώματα, η ανακάλυψη των χημειοφωτιστικών υποστρώσεων που μοιάζουν με τη λουμινόλη έφερε τα υποστρώματα της υπεροξειδάσης του κρέατος από το κρέας στο ταχύ στάδιο ανάπτυξης.και διάφορα χημειοφωτιστικά υποστρώματα με πολύ εμπλουτισμένη υπεροξειδάση κρέπατος.

Η διαφορά μεταξύ χημειοφωτισμού και φθορισμού:

Η χημειοφωτισμό είναι διαφορετική από τη φθορισμό. Σημαίνει ότι η χημική ενέργεια που παράγεται στη διαδικασία της χημικής αντίδρασης απορροφάται για να διεγείρει μόρια και να εκπέμπει φως.Η φθορισμός είναι το φως που εκπέμπεται απορροφώντας φωτεινή ενέργεια για να διεγείρει μόριαΑυτή είναι η χημειοφωτισμός και η διαφορά στη φθορισμό έγκειται στις διαφορετικές μορφές ενέργειας διέγερσης που σχηματίζουν διεγερμένα μόρια μεταξύ των δύο,Η μία είναι χημική ενέργεια και η άλλη είναι φωτεινή ενέργεια.Η ανίχνευση χημειοφωτισμού έχει υψηλή ευαισθησία και χαμηλό φόντο, επομένως χρησιμοποιείται ευρέως.

Σήμερα, υπάρχουν αρκετά κοινά χημειοφωτιστικά υπόστρωμα, συμπεριλαμβανομένων των λουμινολών, των υπεροξοξαλατών και των εστέρων ακριδίνης.Χημειοφωτιστικά αντιδραστήριαΟι εν λόγω μέθοδοι χρησιμοποιούνται συνήθως στην πραγματική χημική ανάλυση και προσδιορισμό και χρησιμοποιούνται στην ανάλυση φαρμάκων, την παρακολούθηση του περιβάλλοντος κλπ.Τα προαναφερθέντα αντιδραστήρια χημειοφωτισμού παράγονται ειδικά από την Desheng, αλλά πρέπει να σημειωθεί ότι οι εστέρες ακριδίνης μπορούν να εκπέμπουν άμεσα φως και δεν απαιτούν ενζυμική καταλύση.