Το μπουφέρ HEPES: ο "αόρατος βοηθός" στην ανίχνευση του ιού της λύσσας

4-υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθανουσουλφονικό οξύ, συντομογραφία:HEPESστην αγγλική γλώσσα, έχει αριθμό CAS 7365-45-9.2Ως βιολογικό buffering agent, η ρύθμιση του pH είναι η πιο κοινή χρήση του και ευνοείται ιδιαίτερα από τους μεγάλους κατασκευαστές στον τομέα της φροντίδας του δέρματος.Ο κρίσιμος ρόλος του στην ανίχνευση του ιού της λύσσας είναι ελάχιστα γνωστός, και θα παρέχουμε μια λεπτομερή εισαγωγή παρακάτω.

Το δίλημμα των παραδοσιακών μεθόδων ανίχνευσης του ιού της λύσσας

Όταν ο ιός της λύσσας αναπαράγεται σε μολυσμένα κύτταρα, συνήθως δεν προκαλεί κυτοπατικές επιδράσεις (CPE), και είναι επίσης δύσκολο να σχηματιστούν πλάκες υπό συμβατικές συνθήκες καλλιέργειας.Παρόλο που πολλοί μελετητές στο εσωτερικό και στο εξωτερικό έχουν επιτυχώς καθιερώσει μεθόδους πλάκας ιού λύσσας σε κύτταρα εμβρύου κοτόπουλου και κύτταρα BHK-21Οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι οι μέθοδοι αυτές έχουν προφανή μειονεκτήματα.σύνθεση αερίων, κλπ. Ορισμένα στάδια λειτουργίας είναι περίπλοκα και απαιτούν επαγγελματίες τεχνικούς να υποβληθούν σε μακροχρόνια κατάρτιση για να τα κατακτήσουν επιδέξια,Η εν λόγω μέθοδος έχει ως αποτέλεσμα να περιορίζεται σημαντικά η προώθηση και η εφαρμογή αυτών των μεθόδων..

Μεγάλη πρόοδος στην εφαρμογή του HEPES στην ανίχνευση ιών λύσσας

Οι ερευνητές ανακάλυψαν κατά λάθος ότι το HEPES μπορεί να ενισχύσει την παθογόνο επίδραση του ιού της λύσσας στα μολυσμένα κύτταρα.ερευνητές έχουν δημιουργήσει με καινοτόμο τρόπο μια απλή και γρήγορη μέθοδο χαρακτικής πλάκας HEPES για τον ιό της λύσσας.

Το HEPES προάγει σημαντικά το σχηματισμό λεκέδων διάβρωσης

Στο πείραμα, τα μολυσμένα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε θερμοκρασία 37 °C για 3-5 ημέρες, και στη συνέχεια μια ομάδα μολυσμένων κυττάρων υποβλήθηκε σε θεραπεία με HEPES.εμφανείς κυτταρικές βλάβες μπορούν να παρατηρηθούν σαφώς στο κάτω μέρος της επικάλυψηςΣτη συνέχεια, χρησιμοποιήθηκε χρώμα κρυστάλλιο μωβ, και οι κηλίδες διάβρωσης ήταν σαφώς ορατές.η ομάδα μολυσμένων κυττάρων χωρίς θεραπεία με HEPES δεν παρουσίασε ούτε κυτταροπαθητικές επιδράσεις ούτε σχηματισμό πλάκαςΑυτό το πειραματικό αποτέλεσμα αποδεικνύει έντονα ότι το HEPES έχει σημαντική προωθητική επίδραση στο σχηματισμό πλάκας του ιού της λύσσας στα κύτταρα BHK.

Η μέθοδος χαρακτικής HEPES έχει υψηλή ευαισθησία

Η εξέταση πλάκας HEPES δεν είναι μόνο εύκολη στη λειτουργία, αλλά αποδίδει επίσης καλά στην τιτλοποίηση των τίτλων ιογενούς λοίμωξης.Πειραματικά δεδομένα δείχνουν ότι υπάρχει σαφής σχέση τιτρώματος μεταξύ του αριθμού των πλάκας που σχηματίζονται μετά από ιογενή λοίμωξη και της αραίωσης του ιού.Λαμβάνοντας το στέλεχος CTN-BHK του ιού της λύσσας ως παράδειγμα, οι τίτλοι μόλυνσης προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας αντίστοιχα ανάλυση πλάκας HEPES και ανάλυση ποντικιού.διαπιστώθηκε ότι ο αριθμός των πλάκας που μετρήθηκε με τη μέθοδο HEPES πλάκας κυμαινόταν από 10, 0 × 10 ° έως 4, 0 × 10 * PFU/ ml, ενώ οι τίτλοι μόλυνσης που μετρήθηκαν με τη μέθοδο ποντικιού ήταν μεταξύ 6, 0 - 6, 8 log ή 1,0 × 10 ° έως 6, 3 × 10 / ml.Αυτό το αποτέλεσμα αποδεικνύει πλήρως τη συνέπεια στην ευαισθησία μεταξύ της ταχείας μεθόδου HEPES και της μεθόδου ποντικιού..

Η μέθοδος χαρακτικής HEPES έχει εξαιρετικά πλεονεκτήματα

Κατά τη μελέτη της τιτλοποίησης του ιού μόλυνσης του ιού της λύσσας CTN-181 και των στελεχών CTN-BNK,διαπιστώθηκε ότι η χρήση HEPES μπορεί να προκαλέσει αποτελεσματικά και να ενισχύσει την παθογόνο επίδραση του ιού λύσσας στα μολυσμένα κύτταραΗ συγκεκριμένη μέθοδος λειτουργίας είναι η ακόλουθη: μετά τη λοίμωξη των κυττάρων από ιό, καλλιεργούνται σε θερμοκρασία 37 °C για 3-5 ημέρες,προστίθενται 50-100 mmol/L HEPES σταγονιδιακά στο κάλυμμα του ημισφαιρικού μέσου μεθυλοκυτταρίνης, χρωματίζεται με διαλύμα κρυστάλλιο βιολετί μετά από 24 ώρες και στεγνώνεται σε θερμοκρασία δωματίου για να υπολογιστεί άμεσα ο αριθμός των κηλίδων διάβρωσης με γυμνό μάτι.Σε σύγκριση με προηγούμενες εκθέσεις βιβλιογραφίας σχετικά με τις μεθόδους χαρακτικής, αυτή η μέθοδος έχει πολλά πλεονεκτήματα όπως ταχύτητα, απλότητα, οικονομία, ευαισθησία και ευκολία μάθησης.

Το HEPES που παράγεται από την εταιρεία Desheng φτάνει στο επίπεδο του αντιδραστήρα με καθαρότητα μεγαλύτερη από 99%.Έχουμε δημιουργήσει συνεργατικές σχέσεις με πολλούς κατασκευαστές.Για την ευκολία της εμπειρίας των πελατών, η εταιρεία μπορεί να παρέχει δωρεάν δείγματα για δοκιμή.Αν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις ή ανάγκες, παρακαλώ κάντε κλικ στην επίσημη ιστοσελίδα για περισσότερες λεπτομέρειες ή επικοινωνήστε μαζί μου απευθείας!