Εισαγωγή του απομονωτή φωσφορικού άλατος

Στα βιοχημικά πειράματά μας, όπως η αντίδραση Trinder chromogen του υποστρώματος, του εστέρα ακριδίνης του luminescent υποστρώματος και των διάφορων ενζυμικών αντιδράσεων, χρησιμοποιούμε τους βιολογικούς απομονωτές, όπως το bicine, Tris, οι σφουγγαρίστρες, και τα πιό βασικά συστήματα απομονωτών οξικού άλατος και φωσφορικού άλατος. Μπορεί να ειπωθεί ότι εφ' όσον υπάρχουν απαιτήσεις pH για το περιβάλλον αντίδρασης, οι απομονωτές απαιτούνται στο σύστημα.

Απομονωτής στην παράδοση

Ο λόγος για τον οποίο το ρυθμιστικό διάλυμμα μπορεί να ρυθμίσει το pH είναι ότι είναι ένας αδύνατος ηλεκτρολύτης, ο οποίος χωρίζεται μερικώς στη λύση και υπάρχει μερικώς υπό μορφή μορίων, και δεν παρουσιάζει την οξύτητα και αλκαλικότητα. Τα μόριά του διαμορφώνουν μια δυναμική ισορροπία με τα ιοντικές κλιμένες οξέα ή τις βάσεις τους (pH = PKA + το LG, χωρισμένη συγκέντρωση είναι υψηλότερο από αυτό της μη χωρισμένης συγκέντρωσης). Εάν το pH του συστήματος αλλάξει, η υπο- δυναμική ισορροπία θα κινηθεί για να φθάσει σε μια νέα ισορροπία, ρυθμίζοντας κατά συνέπεια το pH.

Η αποτελεσματική σειρά απομονωτών ενός συστήματος απομονωτών είναι συνήθως στη σειρά δύο μονάδων pH με την αξία pKa ως μεσαίο σημείο, δηλ., η αποτελεσματική σειρά pH του απομονωτή = pKa ± 1. Επομένως, όταν το pH του ρυθμιστικού διαλύμματος είναι ίσο με το pKa του απομονωτή, η ρυθμιστική ικανότητα είναι η μεγαλύτερη. Εάν θέλουμε να σχεδιάσουμε ένα νέο σύστημα απομονωτών, πρέπει μόνο να ανακαλύψουμε και να επιλέξουμε τους απομονωτές η των οποίων αξία pKa είναι ίση με την απαραίτητη αξία pH.

Στα βιοχημικά πειράματα, υπάρχουν πολλοί συνήθως χρησιμοποιημένοι βιολογικοί απομονωτές. Το φωσφορικό άλας είναι ο ευρύτατα χρησιμοποιημένος και βασικός απομονωτής στη βιοχημική έρευνα. Το φωσφορικό οξύ είναι ένα τριαδικό οξύ. Επειδή είναι δευτεροβάθμιος διαχωρισμός και έχουν δύο τιμές pKa, η σειρά pH του απομονωτή που προετοιμάζεται με τους είναι η ευρύτερη, και το άλας καλίου είναι καλύτερο από το άλας νατρίου, επειδή το άλας νατρίου είναι δύσκολο να διαλυθεί στη χαμηλή θερμοκρασία και το άλας καλίου είναι εύκολο να διαλυθεί, αλλά εάν SDS προετοιμάζεται το ρυθμιστικό διάλυμμα polyacrylamide της ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων μπορεί μόνο να χρησιμοποιήσει το φωσφορικό άλας νατρίου αντί του φωσφορικού άλατος καλίου, επειδή SDS (αλκυλικό θειικό άλας δώδεκα) θα παραγάγει το αδιάλυτο αλκυλικό θειικό άλας καλίου δώδεκα με το άλας καλίου.

Το φωσφορικό άλας είναι εύκολο να προετοιμαστεί στις διάφορες συγκεντρώσεις του ρυθμιστικού διαλύμματος, κατάλληλες για ένα ευρύ φάσμα του pH, το pH επηρεάζεται λιγότερο από τη θερμοκρασία, την αλλαγή pH αφότου η διάλυση είναι μικρή, και την αλλαγή pH αφότου δέκα φορές η διάλυση είναι λιγότερο από 0,1. Εντούτοις, στο σύστημα λύσης με τα ιόντα μετάλλων, το σύστημα φωσφορικού οξέος θα συνδέσει με τα κοινά ιόντα ασβεστίου, τα ιόντα MG και τα ιόντα βαρύ μετάλλου για να διαμορφώσει την πτώση.

Ο απομονωτής Tris που παράγεται από μας έχει χρησιμοποιηθεί όλο και περισσότερο στη βιοχημική έρευνα, και έχει μια τάση να υπερβεί τον απομονωτή φωσφορικού άλατος. Παραδείγματος χάριν, ο απομονωτής Tris έχει χρησιμοποιηθεί polyacrylamide SDS- στην ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων, και το φωσφορικό άλας χρησιμοποιείται σπάνια. Η ACD λύση που χρησιμοποιείται στο σκάφος συλλογής αίματος PrP μας χρειάζεται το κιτρικό άλας νατρίου και το κιτρικό οξύ για να ρυθμίσει το pH. το κιτρικό άλας εδώ όχι μόνο ρυθμίζει την ωσμωτική πίεση, αλλά και ενεργεί ως απομονωτής. Είναι επίσης ένα τριαδικό οξύ όπως το φωσφορικό οξύ.