Μέθοδος για το ένζυμο και το χρωμογενές υπόστρωμα στην αντίδραση Trinder

Στον τομέα της διαγνωστικής in vitro, η χρωματιστομετρία των ενζύμων είναι μια κοινή μέθοδος για ποσοτική ή ποιοτική δοκιμή των στοχευόμενων συστατικών και χρησιμοποιείται ευρέως στην Κίνα,όπως η μέθοδος ανίχνευσης της αντίδρασης χρώματος του ενζύμου HRP που καταλύεται από το χρωμογενές υπόστρωμαΠΟΥΣΛόγω της συμμετοχής των ενζύμων, είναι πολύτιμο να βελτιωθεί η σταθερότητα του ενζυματικού υποστρώματος χρώματος.

Ορισμένα προϊόντα αντίδρασης με υψηλή μολική απορρόφηση χρωμογενών υποστρώσεων, όπως TOOS, TOPS κλπ., μπορούν να χρησιμοποιηθούν σε υγρές χημικές μεθόδους καθώς και σε ξηρές χημικές μεθόδους:τα απαιτούμενα αντιδραστήρια αντίδρασης (TOOS), 4-AAP) και τα απαιτούμενα ένζυμα (HRP) κλπ.) Εγκαθίσταται στον φορέα μεμβράνης και το δείγμα προστίθεται σταγονιδιακά για την παραγωγή H2O2 και στη συνέχεια απελευθερώνει νέο οικολογικό οξυγόνο,οξείδωση του υποστρώματος χρώματοςΤα ένζυμα είναι πολύ συγκεκριμένα και πολύ αποτελεσματικά στην καταλύση.έχουν κακή σταθερότητα υπό την επίδραση της θερμοκρασίαςΣτις υγρές χημικές μεθόδους, τα ένζυμα αδρανοποιούνται εύκολα όταν βρίσκονται σε υγρή κατάσταση ή σε χαμηλές συγκεντρώσεις.

Χρωμογενές υπόστρωμα TOOS σκόνη

Από την άλλη πλευρά, τα περισσότερα χρωμογενή υποστρώματα, όπως το TOOS, το MAOS, το TMB κλπ., επίσης οξειδώνονται εύκολα και αργά, έτσι ώστε τα διαλύματα τους να μην εκτίθενται στον αέρα για μεγάλο χρονικό διάστημα.Υπάρχουν πολλοί τρόποι για τη βελτίωση της σταθερότητας των βιολογικά ενεργών ενζύμων και των χρωμογενών υποστρώσεων:

1Η προσθήκη προστατευτικού παράγοντα σε ενζυματικό διάλυμα μπορεί να καταστήσει σταθερή τη δραστηριότητα διαφόρων ενζύμων όπως ALT, AST, LDH, ALP, CK σε υδατικό διάλυμα ή στη μήτρα ορού για 2 εβδομάδες σε θερμοκρασία δωματίου.αλλά η επίδραση στο ξηρό χημικό χαρτί δοκιμής δεν είναι σημαντική.

2Η μέθοδος σταθεροποίησης του υποστρώματος που αναπτύσσει χρώμα χρησιμοποιεί επιφανειοδραστικές ουσίες και φλαβονοειδείς χρωστικές ουσίες με αλκυλική ομάδα με 8 έως 16 άτομα άνθρακα, αλλά ο τύπος είναι περίπλοκος.Τα αντιδραστήρια είναι δύσκολο να αγοραστούν., και ο προστατευτικός παράγοντας παρεμβαίνει στα αποτελέσματα της δοκιμής.

3Υπάρχει ένας προστατευτικός παράγοντας που είναι πιο αναγωγικός από το υποστρώμα που αναπτύσσει το χρώμα, αλλά ο προστιθέμενος προστατευτικός παράγοντας περιέχει πρωταρχικές αμινοομάδες και συχνά προκαλεί μη ειδικές αντιδράσεις.

4Η χρήση αζοχρωστικών ως σταθεροποιητών του υποστρώματος που αναπτύσσει χρώμα έχει καλή σταθεροποιητική επίδραση και δεν προκαλεί παρεμβολές.αλλά το μέγιστο μήκος κύματος απορρόφησης της βαφής είναι μερικές φορές κοντά σε αυτό του παράγοντα ανάπτυξης χρώματος, το οποίο κάνει τον κενό έλεγχο λίγο υψηλότερο.

5. Προστατευτικό μέσο για το πολυμερές και τη σύνθεσή του, το οποίο μπορεί να βελτιώσει τη σταθερότητα των ενζύμων και των χρωμογενών υποστρωμάτων.κατάλληλο για HRP, CHO κλπ. Ενζύμιο, κατάλληλο για την ανίχνευση της γλυκόζης, της κρεατινίνης, του ουρικού οξέος, της χοληστερόλης, των τριγλυκεριδίων και άλλων δεικτών.

Μπορεί να παρατηρηθεί ότι διάφοροι υφιστάμενοι προστατευτικοί παράγοντες για ένζυμα ήχρωμογενή υποστρώματα, ορισμένα από τα οποία είναι ελαττωματικά, όπως το υψηλό κόστος, η προκατειλημμένη ανίχνευση και είναι κατάλληλα μόνο για υγρές χημικές μεθόδους κλπ.,Η μέθοδος χρειάζεται περαιτέρω έρευναΗ Desheng είναι κατασκευαστής χρωμογενών υποστρώσεων και ενζύμων.