Στη σχετική βιοχημική δοκιμή των ενζυμικών προετοιμασιών, εκτός από τη μέτρηση του περιεχομένου, της συγκέντρωσης, και της σταθερότητας των διάφορων δεικτών που εξετάζονται, υπάρχουν επίσης δείκτες για την ανίχνευση της ενζυμικής δραστηριότητας, όπως τα σάκχαρα αίματος, τα λιπίδια αίματος, και η κρεατινίνη. Για τους δείκτες όπως transaminase και sarcosine η οξειδάση, η ενζυμική δραστηριότητα πρέπει να μετρηθεί.
Κατά γενική ομολογία, η ενζυμική δραστηριότητα είναι η δραστηριότητα της ενζυμικής κατάλυσης, η οποία περιλαμβάνει μια κινητική παράμετρο του ένζυμο-Michaelis σταθερό χλμ, το οποίο σημαίνει τη συγκέντρωση του υποστρώματος (σ) όταν φθάνει η ενζυματική αντίδραση στη μισή από τη μέγιστη ταχύτητα (VM). Η ταχύτητα της ενζυμικής αντίδρασης δεν είναι ομοιόμορφη, μη γραμμική όπως τη συγκέντρωση, αλλά ο αριθμός μετρητών σε Changshu είναι σταθερός, το οποίο είναι μια χαρακτηριστική φυσική ποσότητα του ενζύμου. Το Michaelis σταθερό του ενζύμου αλλάζει με το μετρημένο τύπο υποστρωμάτων, τη θερμοκρασία αντίδρασης, το pH και την ιοντική δύναμη. Υπό τους ίδιους όρους, η των οποίων συγκέντρωση του ενζύμου είναι, η συγκέντρωση του απαραίτητου υποστρώματος είναι η ίδια όταν επιτυγχάνεται το μέγιστο ποσοστό αντίδρασης.
Μέθοδος μέτρησης Michaelis σταθερή sarcosine της οξειδάσης:
Προετοιμάστε μια sarcosine λύση με μια συγκέντρωση 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0, 9,0, 10.0mmo1/L με τον απομονωτή tris-HC1 του pH 8,0, και αντιδράστε σε 37°C για 5 λεπτά καθορίζει την αρχική δραστηριότητα οξείδωσης SOX στις διαφορετικές sarcosine συγκεντρώσεις. Το ποσοστό Β και 1/V αντίδρασης λαμβάνεται. Σύμφωνα με τη διπλή αμοιβαία μέθοδο χαρτογράφησης lineweaver-Burk, με 1 [s] ως τετμημένη και 1/V ως συντεταγμένη, χλμ και το Vmax SOX sarcosine υπολογίστηκαν.
Συμπέρασμα Michaelis σταθερό sarcosine της οξειδάσης:
Η σταθερά Michaelis μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να κρίνει την ιδιομορφία του ενζύμου. Όσο μικρότερη η αξία χλμ, τόσο μεγαλύτερη η συγγένεια μεταξύ του ενζύμου και του υποστρώματος, και τόσο καταλληλότερος το υπόστρωμα είναι ως φυσικό υπόστρωμα του ενζύμου. Σύμφωνα με τη δοκιμή και τον υπολογισμό sarcosine της οξειδάσης ανωτέρω, η εξίσωση Michaelis είναι y=1232.5X+8.7012 και ο συντελεστής συσχετισμού είναι 0,9947: οι υπολογισμένες τιμές χλμ και Vmax SOX sarcosine είναι 141.6mmol/L και 0.115mmol, αντίστοιχα/(L.min).
Πρέπει να σημειωθεί ότι sarcosine η οξειδάση SOX από τις διαφορετικές πηγές έχει μια ορισμένη διαφορά στο Michaelis σταθερό sarcosine. Παραδείγματος χάριν, η αξία χλμ SOX από Corynebaclerium sarcosine είναι 21mmol/L. Δεδομένου ότι η σταθερά Michaelis δεν έχει καμία σχέση με τη συγκέντρωση του ενζύμου και τον τύπο ενζύμου, αυτό το σημείο μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τον ενζυμικό προσδιορισμό ή τον προσδιορισμό. Η βιοχημική εστίαση Desheng στον τομέα της βιοχημικής ανίχνευσης, και παρέχει ποικίλες ενζυμικές προετοιμασίες συμπεριλαμβανομένου SOX, esterase χοληστερόλης, της οξειδάσης γλυκόζης, κ.λπ.
