Υπάρχουν τόσοι πολλοί τύποι βιολογικών απομονωτών, πιστεύω ότι δεν πρέπει να πω περισσότερους, οι άνθρωποι το ξέρουν εάν καταλαβαίνουν ή όχι. Επομένως, υπάρχουν πολλές αβεβαιότητες στην επιλογή μας. Δεν ξέρω όποιος είναι αυτό που χρειάζεστε και όποιος είναι κατάλληλος. Σε απάντηση σε αυτό το πρόβλημα, Desheng, ως κατασκευαστής των βιολογικών απομονωτών, σας διδάσκει πώς να επιλέξει.
1. Σειρά απομονωτών
Κάθε απομονωτής έχει την υψηλότερη αποθηκεύοντας ικανότητα στη σειρά pH. Αυτή η ικανότητα καθορίζεται συνήθως από το pKa του απομονωτή. Πρέπει να επιλέξετε έναν απομονωτή με μια αξία pKa κοντά στη μέση αξία της επιθυμητής σειράς (συνήθως, συστήνεται να χρησιμοποιηθεί ένας απομονωτής με μια αξία pKa τουλάχιστον μέσα σε μια μονάδα pH της αξίας pH στόχων).
2. αλλαγές pH κατά τη διάρκεια του πειράματος
Είναι σημαντικό να εξεταστεί εάν το pH μπορεί να αυξηθεί ή να μειωθεί κατά τη διάρκεια του πειράματος. Εάν αναμένετε το pH για να αυξηθείτε, πρέπει να επιλέξετε έναν απομονωτή με ένα pKa ελαφρώς υψηλότερο από τη βέλτιστη αξία στην αρχή του πειράματος. Το αντίθετο ισχύει επίσης: εάν αναμένετε μια μείωση στο pH, επιλέξτε έναν απομονωτή με ένα χαμηλότερο pKa.
3. Συγκέντρωση απομονωτών
Η συγκέντρωση του απομονωτή πρέπει να ρυθμιστεί για να έχει την ικανοποιητική ικανότητα για το πειραματικό σύστημα. Εν ολίγοις, εάν η συγκέντρωση του απομονωτή είναι πάρα πολύ χαμηλή, δεν θα είναι σε θέση να σταθεροποιήσει το pH της λύσης. Αντιθέτως, εάν η συγκέντρωση είναι πάρα πολύ υψηλή, ο απομονωτής είναι πιθανό να έχει επιπτώσεις στο πείραμα. Γενικά, συστήνεται να χρησιμοποιηθεί μια συγκέντρωση υψηλότερη από 25 χιλ.
Για τα συστήματα που δεν ανταλλάσσουν ενεργά τα πρωτόνια υδρογόνου, η συνιστώμενη συγκέντρωση είναι συνήθως 25-100 χιλ. Για τα συστήματα όπου η ανταλλαγή πρωτονίων μπορεί να εμφανιστεί, συστήνεται να χρησιμοποιηθεί μια συγκέντρωση απομονωτών 20 φορές υψηλότερη από τη μοριακή συγκέντρωση των ανταλλαγμένων πρωτονίων.
Κατά την προετοιμασία του ρυθμιστικού διαλύμματος, θυμηθείτε να ρυθμίσετε τη συγκέντρωση της λύσης στην προοριζόμενη συγκέντρωση χρήσης.
4. Αλλαγές θερμοκρασίας
Το pH του ρυθμιστικού διαλύμματος πρέπει να τεθεί σύμφωνα με τη θερμοκρασία στην οποία το πείραμα θα εκτελεσθεί. Η θερμοκρασία έχει επιπτώσεις άμεσα στο pKa του απομονωτή, ο οποίος έχει επιπτώσεις με τη σειρά στην αξία pH και την αποθηκεύοντας ικανότητα του συστήματος. Αυτή η κατάσταση μπορεί να είναι πολύ κρίσιμη στα βιολογικά συστήματα. Στα βιολογικά συστήματα, η ακριβής συγκέντρωση ιόντων υδρογόνου απαιτείται για να καταστήσει το σύστημα αντίδρασης οργανωμένο στη μέγιστη αποδοτικότητα.
Το pKa μερικών απομονωτών (όπως οι ΣΩΛΗΝΕΣ) είναι λιγότερο ευαίσθητο στις αλλαγές θερμοκρασίας, αλλά άλλες επιλογές (όπως TRIS, TAP, TES, ή Tricine) περισσότερο επηρεάζονται από αυτές τις αλλαγές.
