Η διαφορά μεταξύ του απομονωτή Tris και του απομονωτή φωσφορικού άλατος

Οι βιολογικοί απομονωτές χρησιμοποιούνται συχνά στα βιοχημικά ερευνητικά πειράματα και είναι της εξαιρετικά σημαντικής σημασίας. Είναι ένα είδος βελτίωσης του ρευστού που μπορεί να αντισταθεί στην επιρροή ενός ισχυρών οξέος και ενός αλκαλίου μικρού ποσού από το εξωτερικό και να διατηρήσει την αξία pH βασικά αμετάβλητη. Μεταξύ των συνήθως χρησιμοποιημένων βιολογικών απομονωτών είναι ρυθμιστικό διάλυμμα Tris, ρυθμιστικό διάλυμμα PBS, απομονωτής ΚΑΛΥΜΜΆΤΩΝ, απομονωτής MOP, απομονωτής TAP και απομονωτής EPPS. Αυτό το άρθρο θα συγκρίνει και θα εισαγάγει το ο συνηθέστερα χρησιμοποιημένο ρυθμιστικό διάλυμμα Tris και το ρυθμιστικό διάλυμμα PBS από διάφορες πτυχές.

1. Σειρά απομονωτών

Το Tris είναι μια αδύνατη βάση με έναν μοριακό τύπο C4H11NO3, ένα μοριακό βάρος 121,14, και ένα pKa 8,1 σε 25 °C. Η αποτελεσματική σειρά απομονωτών του απομονωτή της είναι μεταξύ του pH 7,0 και 9,2. Οι τιμές pH που χρησιμοποιούνται συνήθως στα βιοχημικά πειράματα είναι 6,8, 7,4, 8,0, και 8,8. Το Tris χρησιμοποιείται ευρέως κατά την προετοιμασία των απομονωτών στη βιοχημεία και τα μοριακά πειράματα της βιολογίας, και έχει ακόμη και μια τάση να υπερβεί τους απομονωτές φωσφορικού άλατος.

Αποθηκευμένος φωσφορικό άλας αλατούχος (PBS) είναι μια αλατισμένη λύση με το φωσφορικό άλας ως απομονωτής pH και το χλωριούχο νάτριο ως ισορροπία ωσμωτικής πίεσης. Συνήθως χρησιμοποιούνται ο απομονωτής φωσφορικού άλατος νατρίου και ο απομονωτής φωσφορικού άλατος καλίου. Λόγω του δευτεροβάθμιου διαχωρισμού τους και ενός ευρέος φάσματος των αποθηκεύοντας τιμών pH, είναι τα ευρύτατα χρησιμοποιημένα ρυθμιστικά διαλύμματα στη βιοχημική έρευνα.

2. Μέθοδος διαμόρφωσης

Υπάρχουν δύο τρόποι να προετοιμαστεί ο απομονωτής tris-HCL: προετοιμάστε Tris και HCL τις λύσεις χωριστά, και έπειτα μιγμάτων σύμφωνα με τους όγκους που απαριθμούνται στον κοινό πίνακα. Εντούτοις, επειδή η τυποποιημένη συγκέντρωση του αραιού υδροχλωρικού οξέος δεν είναι εύκολο να προετοιμαστεί, μια άλλη μέθοδος χρησιμοποιείται συνήθως: Πάρτε τη διαμόρφωση του απομονωτή tris-HCL για παράδειγμα: αρχικά διαλύστε τη βάση Tris 950 στο εξιοντισμένο μιλ. νερό mL~970, προσθέστε το HCL dropwise ανακατώνοντας, και χρησιμοποιήστε τα μέτρα μετρητών pH η αξία pH της λύσης στην απαραίτητη αξία pH, και προσθέτει έπειτα το νερό σε την.

Η μέθοδος προετοιμασιών ρυθμιστικού διαλύμματος φωσφορικού άλατος: Ζυγίστε το ΝαCl, KCl, KH2PO4 και K2HPO4, τους διαλύστε σε 800 μιλ. του αποσταγμένου νερού, ρυθμίστε το pH της λύσης σε 7,4 με το HCL, και προσθέστε τελικά το αποσταγμένο νερό για να κάνετε τον όγκο σε 1 Λ. Μπορεί να αποθηκευτεί σε ένα ψυγείο σε 4 ℃. Πρέπει να σημειωθεί ότι η συνηθισμένη συγκέντρωση αναφέρεται στη συγκέντρωση όλων των φωσφορικών αλάτων στο ρυθμιστικό διάλυμμα, όχι η συγκέντρωση Na+ ή K+. Na+ και K+ χρησιμοποιούνται μόνο για να ρυθμίσουν την ωσμωτική πίεση. Το άλας καλίου είναι καλύτερο από το άλας νατρίου κατά το διαμόρφωση του ρυθμιστικού διαλύμματος φωσφορικού άλατος. Το άλας νατρίου δεν είναι εύκολο να διαλυθεί στη χαμηλή θερμοκρασία, ενώ το άλας καλίου έχει τη σχετικά υψηλότερη διαλυτότητα.

3. Τομέας της χρήσης

Το ρυθμιστικό διάλυμμα Tris διαμορφώνει ένα σύστημα απομονωτών με τη γλυκίνη στον απομονωτή ηλεκτροφόρησης για να σταθεροποιήσει το pH το σύστημα απομονωτών tris-HCL χρησιμοποιείται στο πήκτωμα για να σταθεροποιήσει το pH χρησιμοποιείται ευρέως ως διαλύτης για τα νουκλεϊνικά οξέα και τις πρωτεΐνες η χαμηλή ιοντική δύναμη του απομονωτή Tris είναι επίσης αυτό μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να διαμορφώσει τις ενδιάμεσες ίνες nematodes προσθέστε EDTA στον απομονωτή υδροχλωρικού οξέος Tris για να κάνετε το «απομονωτή TE», ο οποίος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη σταθεροποίηση και την αποθήκευση DNA αλλάξτε το διάλυμα οξέος pH-ρύθμισης στο οξικό οξύ για να λάβετε το «απομονωτή TAE», αλλαγή στο βορικό οξύ για να πάρει τον απομονωτή TBE. Αυτοί οι δύο απομονωτές χρησιμοποιούνται συχνά στα πειράματα ηλεκτροφόρησης νουκλεϊνικού οξέος.

Οι ρυθμιστικές ενεργές βιολογικές προετοιμασίες διαλύμματος φωσφορικού άλατος γενικά πρέπει να αραιωθούν με το ρυθμιστικό διάλυμμα φωσφορικού άλατος. Ο λόγος είναι ότι έχει μια αλατισμένη ισορροπία και μια αποθηκεύοντας επίδραση που μπορούν να ρυθμίσουν την κατάλληλη αξία pH. Το αποσταγμένο νερό δεν έχει καμία αλατισμένη επίδραση ισορροπίας, η οποία θα καταστρέψει τη δομή και τις βιολογικές ιδιότητες των βιολογικών πρωτεϊνών φυσιολογικός αλατούχος δεν έχει την επίδραση της ρύθμισης του pH, και δεν μπορεί να εξασφαλίσει ότι συμμετέχει στις βιολογικές αντιδράσεις υπό τους βέλτιστους όρους για τις πλήρεις και ενεργές ουσίες, έτσι η χρήση PBS προτιμάται. Φυσικά, PBS δεν είναι μια πανάκεια. Μερικές βιολογικά ενεργές ουσίες απαιτούν τους σχετικά υψηλούς όρους, και περισσότερα συστατικά πρέπει να προστεθούν στον απομονωτή ισορροπίας για να διατηρήσουν τους καλύτερους όρους για να εξασφαλίσουν ότι οι βιολογικά ενεργές ουσίες διατηρούν τα πληρέστερα χαρακτηριστικά τους. Επομένως, PBS χρησιμοποιείται κυρίως για τα πειράματα κυττάρων, και η σειρά απομονωτών της είναι καταλληλότερη για ουδέτερο.

Στο βιοχημικό πείραμα, το ρυθμιστικό διάλυμμα πρέπει να επιλεχτεί προσεκτικά, όχι μόνο η σειρά απομονωτών του ρυθμιστικού διαλύμματος, αλλά και το περιβάλλον χρήσης του ρυθμιστικού διαλύμματος πρέπει να εξεταστεί περιεκτικά. Τα νέα υλικά Desheng Hubei έχουν ειδικευτεί στην παραγωγή και την ανάπτυξη των βιολογικών απομονωτών για πολλά χρόνια. Το Desheng έχει μια ανεξάρτητη ομάδα Ε&Α και έχει έναν πλούτο της πρακτικής εμπειρίας στη ανάπτυξη προϊόντος και την παραγωγή. Αυτή τη στιγμή, οι βιολογικοί απομονωτές και άλλα προϊόντα που παράγονται από Desheng έχουν πωληθεί σε πολλές χώρες σε όλο τον κόσμο, και έχουν ανακτηθεί με τον έπαινο, και έχουν φθάσει στη μακροπρόθεσμη συνεργασία με πολλούς ξένους πελάτες. Εάν ενδιαφέρεστε για την κατανόηση, μπορείτε να απαιτήσετε τις διαβουλεύσεις. Το Desheng χαιρετίζει τις κλήσεις σας.