HEPES είναι ένα είδος επαμφοτερίζοντος απομονωτή ιόντων υδρογόνου με την καλή δυνατότητα απομονωτών και μακροπρόθεσμο για να διατηρήσει τη σταθερά pH. Χρησιμοποιείται ευρέως στον απομονωτή αντίδρασης νουκλεϊνικού οξέος, τον απομονωτή υβριδοποίησης και το μέσο κυτταροκαλλιέργειας. Σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά του, υπάρχουν μερικές διαφορές στη διαμόρφωση του απομονωτή στα διαφορετικά πειράματα.
Φυσικές και χημικές ιδιότητες HEPES
2 [4 (2-υδροξυαιθυλικός) - 1-piperazinyl] ethanesulfonic οξύ
CAS αριθ.: 7365-45-9
Μοριακός τύπος: C8H18N2O4S
Μοριακό βάρος: 238.3
Σειρά απομονωτών: 6.8-8.2
Μοριακή δομή:
Ποτό μητέρων HEPES (απόθεμα απομονωτών): άμεσα προετοιμάστε τη λύση 0.51m HEPES και NaOH η λύση, ελέγχει την αναλογία μίξης των δύο για να ρυθμίσει το pH, και έπειτα το αποσταγμένο νερό χρήσης ή το εξαιρετικά καθαρό νερό για να καθορίσει τον όγκο. Εάν είναι απαραίτητο, NaOH μπορεί να αντικατασταθεί από KOH.
HEPES αποθηκεύουν την αλατισμένη λύση: προσθέστε ένα χλωριούχο νάτριο μικρού ποσού και ένα disodium φωσφορικό άλας υδρογόνου στη λύση HEPES, κατόπιν προσθέστε NaOH που το διάλυμα ύδατος, ρυθμίζει το pH, προσθέτει το αποσταγμένο νερό για το σταθερό όγκο, και το κατάστημα στη χαμηλή θερμοκρασία.
Μέσο κυτταροκαλλιέργειας HEPES: προσθέστε ένα χλωριούχο νάτριο μικρού ποσού, ένα χλωρίδιο καλίου, ένα disodium φωσφορικό άλας υδρογόνου, dextran, κ.λπ. σε HEPES που το διάλυμα ύδατος, κατόπιν ρυθμίζει το pH με NaOH τη λύση, και αποθηκεύει τελικά σε έναν σταθερό όγκο και μια χαμηλή θερμοκρασία. Στα πειράματα προσκόλλησης κυττάρων, τα ιόντα ασβεστίου και μαγνήσιου προστίθενται συνήθως στο μέσο πολιτισμού HEPES για να προστατεύσουν το cadherin των κυττάρων και να μην έχουν επιπτώσεις στο σχηματισμό της συνάθροισης κυττάρων.
Εκτάριο λύσης: Hepes-BSA το μέσο κυτταροκαλλιέργειας, που είναι ένα από τα συστατικά του μέσου κυτταροκαλλιέργειας, δεν περιέχει τα ιόντα ασβεστίου και μαγνήσιου, και περιέχει μερικά άλλα αλατισμένα ιόντα. Μετά από την επεξεργασία των βακτηριδίων διήθησης, είναι συνήθως κατάλληλο για τον καθαρισμό και τον πολιτισμό στον αρχικό πολιτισμό των κυττάρων ιστού.
Τα ανωτέρω είναι η διαφορά εφαρμογής του απομονωτή HEPES που αναπτύσσεται και που παράγεται από Desheng στα διαφορετικά πειράματα. Επιπλέον, η μη αδρανοποιημένη λύση συντήρησης ιών πρόσφατα αναπτυγμένη από την επιχείρηση περιέχει επίσης τον απομονωτή HEPES. Επειδή δεν έχει καμία τοξική επίδραση στα κύτταρα, όχι μόνο διατηρεί το pH, αλλά και αυξάνει το τεχνητό χρόνο επιβίωσης των κυττάρων οικοδεσποτών ιών μετά από τη δειγματοληψία, διατηρεί την ακεραιότητα οξέος και της πρωτεΐνης ιών του νουκλεϊνικού στο μέγιστο βαθμό, και βελτιώνει την ακρίβεια ανίχνευσης.
