Αυτό που είναι τα αποτελέσματα των βιολογικών απομονωτών στη βιοχημική δοκιμή

Οι βιολογικοί απομονωτές είναι τα ο συνηθέστερα χρησιμοποιημένα βοηθητικά αντιδραστήρια στη βιοχημική δοκιμή, και οι απομονωτές απαιτούνται για σχεδόν όλα τα υγρά συστήματα αντίδρασης φάσης. Η κύρια λειτουργία της είναι να διατηρήσει την αξία pH του συστήματος αντίδρασης. Οι συνήθως χρησιμοποιημένοι απομονωτές περιλαμβάνουν το φωσφορικό άλας, το οξικό άλας, το άλας αμμωνίου, και Tris, τα MOP, HEPES, κ.λπ. στα βιοχημικά πειράματα.

Υπάρχουν πολλά αποτελέσματα των βιολογικών απομονωτών στη βιοχημική ανίχνευση, κυρίως στην αξία pH της λύσης. Τα συγκεκριμένα αποτελέσματα είναι διευκρινισμένα κατωτέρω.

Ποικίλοι βιολογικοί απομονωτές

Η επίδραση του απομονωτή στην ενζυμική δραστηριότητα:

Οι περισσότερες βιοχημικές δοκιμές είναι αντιδράσεις που περιλαμβάνουν τα ένζυμα. Η καταλυτική αποδοτικότητα των ενζύμων επηρεάζεται πολύ από το pH και τη θερμοκρασία. Κάθε ένζυμο έχει τη βέλτιστη αξία pH του (η αξία pH στην οποία η αποδοτικότητα ενζυμικής καταλυτική αντίδρασης είναι μέγιστη) Επομένως, η βιοχημική ανίχνευση που περιλαμβάνει τα ένζυμα χρειάζεται πρώτα σε επίλεκτο έναν απομονωτή με μια κατάλληλη σειρά απομονωτών σύμφωνα με τη βέλτιστη αξία pH της ενζυμικής προετοιμασίας χρησιμοποιούμενης. Όπως η ενζυματική ανίχνευση αντιδραστηρίων Trinder, ένζυμο-συνδεμένο immunoassay, κ.λπ.

Η επίδραση του απομονωτή στη δομή των μακρομορίων:

Εκτός από την επίδραση του απομονωτή στην καταλυτική αποδοτικότητα του ενζύμου, μπορεί επίσης να έχει επιπτώσεις στη δομή του ενζύμου. Εάν η αξία pH του συστήματος και η αξία pH προσαρμογής του ενζύμου είναι πάρα πολύ διαφορετικές, το ένζυμο μπορεί να αδρανοποιηθεί άμεσα. Αφ' ετέρου, ακόμα κι αν δεν υπάρχει καμία αντίδραση που περιλαμβάνει τα ένζυμα, οι απομονωτές είναι απαραίτητοι. Πολλές μακρομοριακές ουσίες περιλαμβάνονται συχνά στη βιοχημική ανίχνευση, και η δομή τους επηρεάζεται επίσης από το pH.

Παραδείγματος χάριν, chemiluminescence εστέρα ακριδίνης ανίχνευση. Αν και η αντίδραση του εστέρα ακριδίνης και του υπεροξειδίου υδρογόνου δεν απαιτεί την ενζυμική κατάλυση, μπορεί να εκπέμψει το φως άμεσα, αλλά στην ανάλυση CLIA, ο εστέρας acridinium ονομάζεται συνήθως την πρωτεΐνη, το αντιγόνο, το αντίσωμα ή το νουκλεϊνικό οξύ, αυτές οι μακρομοριακές ουσίες που η δομή είναι σύνθετη και επηρεάζεται από το pH του συστήματος, τόσο οι βιολογικοί απομονωτές απαιτούνται επίσης.

Η επίδραση του απομονωτή στην ωσμωτική πίεση:

Πολλοί απομονωτές είναι οργανικά αδύνατα όξινα και αδύνατα ζευγάρια όξινος-βάσεων βάσεων συζευγμένα. Οι διαφορετικοί απομονωτές έχουν τις διαφορετικές ιοντικές δυνάμεις, οι οποίες έχουν επιπτώσεις στην αλατισμένη συγκέντρωση και την ωσμωτική πίεση του συστήματος. HEPES χρησιμοποιείται συχνά ως απομονωτής για την κυτταροκαλλιέργεια, και ένας απομονωτής που έχει επιπτώσεις στην ωσμωτική πίεση της μεμβράνης κυττάρων και μπορεί να προκαλέσει τη ρήξη δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί.

Επιπλέον, οι διαφορετικοί απομονωτές έχουν τις διαφορετικές να περιπλέξουν ικανότητες για τα διαφορετικά ιόντα μετάλλων. Παραδείγματος χάριν, το σύστημα που περιέχει τα ιόντα ασβεστίου και μαγνήσιου χρησιμοποιεί τον απομονωτή Tris αντί PBS. Η δραστηριότητα πολλών ενζύμων και πρωτεϊνών συσχετίζεται με τη συγκέντρωση των ιόντων μετάλλων. Το Desheng είναι καθιερωμένος κατασκευαστής των βιοχημικών απομονωτών, οι οποίοι μπορούν να παρέχουν περισσότερα από δέκα είδη βιολογικών απομονωτών.