Το πλήρες όνομα τουΤαμείο ασφαλείας HEPESείναι 4-υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθανοσουλφονικό οξύ, CAS είναι 7365-45-9, το HEPES χρησιμοποιείται συχνά σε βιολογικούς αποθηκευτικούς αγωγούς, εύρος pH αποθηκευτικού αγωγού: 6,8-8.2, το κύριο συστατικό του tampon του hepes είναι το υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθυλθειικό οξύ, το HEPES είναι αμφοτερικό tampon, το οποίο είναι διαλυτό στο νερό και δεν σχηματίζει σταθερά συμπλέγματα με ιόντα μετάλλων.Έχει καλή ικανότητα αποθήκευσης στο εύρος pH 7.2-7.4Χρησιμοποιείται κυρίως σε βιοχημικές συσκευές διάγνωσης, συσκευές εκχύλισης DNA/RNA και συσκευές διάγνωσης PCR.
Χρησιμοποιείται σε διάφορες βιοχημικές αντιδράσεις:
1. HEPESαπόθεμα ασφαλείαςχρησιμοποιείται συχνά ως αντιδραστήρας αποθήκευσης στο μέσο κυτταρικής καλλιέργειας διαφόρων τύπων οργανισμών, προσκόλλησης κυττάρων σε κύτταρα, βραχυπρόθεσμης συγκέντρωσης κυττάρων και καλλιέργειας, καθώς και ως αποθήκευση για τον καθαρισμό ιστών και κυττάρων·
2Στην έρευνα για τις πρωτεΐνες, το PIPES χρησιμοποιείται συχνά ως συστατικό και ελαυστικό του δεσμευτικού απόσβεσης στην χρωματογραφία ανταλλαγής κατιόντων.
3Στην έρευνα για το DNA, το PIPES χρησιμοποιείται ως απόθεμα ασφαλείας για το φωσφορικό ασβέστιο και το σύστημα σχηματισμού ρευμάτων DNA, και ως απόθεμα ασφαλείας για τα πειράματα AFM και ηλεκτροποράσεως.
4Επιπλέον, το HEPES έχει μια ορισμένη παρεμβολή στην αντίδραση μεταξύ του DNA και των ενζύμων περιορισμού και δεν είναι κατάλληλο για τη μέθοδο του Lowry για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες.
5Το βούφερ HEPES χρησιμοποιείται συχνά στην έρευνα οργανοειδών και πολύ μεταβλητών, ευαίσθητων σε pH πρωτεϊνών και ενζύμων, καθώς και σε βιοχημικά διαγνωστικά κιτ.Συσκευές εκχύλισης DNA/RNA και συσκευές διάγνωσης PCR.
6. Το αποθηκευτικό σύστημα αντίδρασης, το αποθηκευτικό σύστημα προ-υβριδικοποίησης και το αποθηκευτικό σύστημα υβριδικοποίησης για τον διαχωρισμό και την ανάλυση πυρηνικών συστατικών RNA. Χρησιμοποιείται για RNA και T4RNA.Το βαθμό μοριακής βιολογίας χρησιμοποιείται για την επισήμανση του 3'-τελείου του RNA με T4 RNA λιγάση, διαχωρίζουν και αναλύουν τα συστατικά του αποθέματος ασφαλείας αντίδρασης, του αποθέματος ασφαλείας προ-υβριδισμού και του αποθέματος ασφαλείας υβριδισμού του πυρηνικού RNA.
HEPES σκόνη
Θέματα που σχετίζονται με το HEPES
1Το pH που απαιτείται για τα περισσότερα κύτταρα είναι 7,2-7.4Τα ινώδη κύτταρα προτιμούν ένα υψηλότερο pH (7,4-7,7), ενώ το πέρασμα των μετασχηματισμένων κυτταρικών γραμμών απαιτεί οξύτητα.0-7.4) Δεδομένου ότι τα περισσότερα υγρά καλλιέργειας αποθηκεύονται με το σύστημα του νάτριο-βαϊκαρβονίου (NaHCO3) και του CO2,η συγκέντρωση CO2 στην αέρια φάση θα πρέπει να είναι σε ισορροπία με τη συγκέντρωση του βυθιοκαρβονίου του νατρίου στο υγρό καλλιέργειαςΕάν η συγκέντρωση CO2 στην αέρια φάση ή στον αέρα του θερμοκηπίου ορίζεται στο 5%, η ποσότητα NaHCO3 που προστίθεται στο διάλυμα καλλιέργειας είναι 1,97 g/l.η ποσότητα NaHCO3 που προστίθεται στο διάλυμα καλλιέργειας είναι 3.95g/l. Το καπάκι του φιαλιδίου κυτταρικής καλλιέργειας δεν πρέπει να βιντεοσκοπείται πολύ σφιχτά για να εξασφαλίζεται η ανταλλαγή αερίων.
2Η τιμή pH του διαλύματος καλλιέργειας που χρησιμοποιεί ζεύγος tampons HCO3 και CO2 είναι ασταθής και τείνει να είναι αλκαλική μετά από αποθήκευση για ορισμένο χρονικό διάστημα.Εάν το pH του υγρού καλλιέργειας αλλάζει πολύ γρήγορα, στο υγρό καλλιέργειας μπορεί να προστεθεί απόσβεση HEPES σε τελική συγκέντρωση 10-25mM·
3Το HEPES είναι ένα αμφοτρικό αναισθητικό, το οποίο χρησιμοποιείται κυρίως στη βιολογική έρευνα, όπως η οξειδωτική φωσφορυλίωση, η σύνθεση πρωτεϊνών σε αποστειρωμένο περιβάλλον, η φωτοσυνθετική φωσφορυλίωση, η σταθεροποίηση CO2 κλπ.Το HEPES δεν έχει καμία επίδραση στα υπόστρωμα της μεταλλικής ιονάσης και είναι κατάλληλο για μετάδοση με ηλεκτρονική μικροσκόπηση (TEM)Το HEPES (25mM) μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως υποκατάστατο του αποθέματος αποθήκευσης από το Bicarbonate,ή ως προσθήκη αποστάγματος από Bicarbonate (10-15mM) για την ανακούφιση από τον περιορισμό του περιβάλλοντος καλλιέργειας υψηλής συγκέντρωσης CO2Το διαλυμένο CO2 και το βιοκαρμικό είναι επίσης πολύ σημαντικά για την καλή ανάπτυξη των κυττάρων.
