Ποιος απομονωτής Tris ή EPPS είναι κατάλληλος για τη μέθοδο φαινολών φολίνης να ανιχνεύσει την πρωτεΐνη;

Το εύρος ασφαλείας του Tris είναι περίπου 6-8, το οποίο είναι κατάλληλο για τα περισσότερα βιοχημικά πειράματα, ειδικά στα σχετικά ερευνητικά πειράματα πρωτεΐνης και νουκλεϊνού οξέος.Αποθέτης EPPSΤο ερευνητικό πείραμα είναι πιο ακριβό από το Τρις, οπότε ποιο είναι το κατάλληλο για τη μέθοδο Φόλιν φαινόλης για την ανίχνευση πρωτεϊνών;

Η μέθοδος του αντιδραστήρα Folin-phenol είναι μια βασική μέθοδος που χρησιμοποιείται συνήθως για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης πρωτεϊνών και έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στον τομέα της βιοχημείας.Το EPPS (HEPPS) χρησιμοποιείται συνήθως ως απόθεμα ασφαλείας για τη μέθοδο της φαινόλης Folin για τον εντοπισμό της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες, αντί να χρησιμοποιήσετε Tris απόσβεση.

Το buffer Tris και το EPPS χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες.

Η αρχή χρωματισμού της μεθόδου Folin phenol για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες είναι η ίδια με εκείνη της μεθόδου biuret (αλλά δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί το EPPS για την ανίχνευση biuret/biuret).Η διαφορά είναι ότι το δεύτερο αντιδραστήριοΓια να αυξηθεί η ποσότητα του χρώματος, βελτιώνοντας έτσι την ευαισθησία ανίχνευσης πρωτεϊνών.Το πλεονέκτημα της μεθόδου φαινόλης Folin για την ανίχνευση της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες είναι ότι έχει υψηλή ευαισθησία και είναι πολύ πιο ευαίσθητη από τη μέθοδο biuret.Φυσικά, έχει επίσης κάποια μειονεκτήματα που απαιτεί πολύ χρόνο, η τυποποιημένη καμπύλη δεν είναι ευθεία, η ιδιαιτερότητα είναι φτωχή, και υπάρχουν περισσότερες παρεμβατικές ουσίες.

Οποιαδήποτε ομάδα που παρεμβαίνει στην αντίδραση του βιουρήτη, όπως -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2 και τα συστατικά Tris buffer, σακχαρόζη, θειικό αμμώνιο και σουλφυδρίλιο,μπορεί να παρεμβαίνει στην αντίδραση Φόλιν- φαινόλης και να επηρεάσει την τελευταία πολύ περισσότεροΕπιπλέον, οι φαινόλες και το κιτρικό οξύ παρεμβαίνουν επίσης σε αυτή την αντίδραση.

Το αντιδραστήρα φολίνης-φαινόλης αποτελείται από δύο αντιδραστήρες.Ο πεπτιδικός δεσμός στην πρωτεΐνη αντιδρά με το διάλυμα καλίου νατρίου χαλκού σε αλκαλικές συνθήκες για να σχηματίσει ένα μωβ-κόκκινο σύμπλεγμαΤο δεύτερο αντιδραστήρα αποτελείται από φωσφομολυβδικό οξύ, φωσφοτονγκστικό οξύ, θειικό οξύ, βρώμιο κλπ.το αντιδραστήριο αυτό μειώνεται εύκολα από την φαινολική ομάδα της τυροζίνης στην πρωτεΐνη για να παράγει μια μπλε αντίδρασηΗ μέθοδος αυτή είναι επίσης κατάλληλη για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε τυροζίνη και τριπτοφάνη.Το εύρος μέτρησης αυτής της μεθόδου είναι 25-250μg πρωτεΐνης..

Συνοπτικά, το πλεονέκτημα της μεθόδου φαινόλης Folin για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες είναι η υψηλή ευαισθησία, αλλά το μειονέκτημα είναι ότι απαιτεί μεγάλο χρόνο και παρεμβαίνει.Η Τρις μπορεί επίσης να προκαλέσει παρεμβολές.Η Desheng παράγει και τα δύο.βιολογικά αποθέματα ασφαλείας, όχι για να πω ποια είναι καλύτερη, αλλά για να είναι κατάλληλη για διαφορετικές πειραματικές μελέτες.