Πρέπει να ξέρετε αυτήν την γνώση για χοίρειο trypsin

Αυτό που είναι trypsin

Trypsin (C6H15O12P3) είναι ένα είδος πρωτεάσης. Στα σπονδυλωτά, λειτουργεί ως χωνευτικό ένζυμο. Στο πάγκρεας, είναι συντεθειμένο ως πρόδρομος του ενζύμου trypsinogen. Εκκρίνεται ως συστατικό του παγκρεατικού χυμού και αποσυντίθεται ενεργοποιημένο trypsin κάτω από τον περιορισμό του enterokinase ή trypsin. Είναι endopeptidase που μπορεί να κόψει την καρβοξυλική πλευρά των υπολειμμάτων λυζίνης και arginine στη polypeptide αλυσίδα. Όχι μόνο λειτουργεί ως χωνευτικό ένζυμο, αλλά και περιορίζει την αποσύνθεση των προδρόμων άλλων ενζύμων όπως το chymotrypsinogen, carboxypeptidase, και η φωσφολίπαση, και έχει μια ενεργοποιώντας επίδραση. Είναι η πιό συγκεκριμένη πρωτεάση, και έχει γίνει ένα αναπόφευκτο εργαλείο στον καθορισμό της ακολουθίας αμινοξέος μιας πρωτεΐνης.

Εισαγωγή χοίρειο trypsin

Η σχετική μοριακή μάζα χοίρειος trypsinogen είναι περίπου 24 000. Σύμφωνα με τη διαφορά στο ισοηλεκτρικό σημείο, χοίρειος trypsinogen μπορεί να διαιρεθεί σε ανιονικό (pl6.8<6>). Επειδή ο κατιονικός τύπος όχι μόνο έχει μια μεγαλύτερη συγκεκριμένη πυκνότητα, αλλά και έχει την καλύτερη σταθερότητα από τον ανιονικό τύπο, κατιονικός χοίρειος trypsinogen επιλέχτηκε για την κατασκευή και την έκφραση. Χοίρειος trypsinogen περιέχει 12 cysteines, τα οποία μπορούν να διαμορφώσουν 6 ζευγάρια των δεσμών δισουλφιδίου (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220), τα οποία αύξησαν πολύ τη δυσκολία της αλλοίωσης και renaturation των οργανισμών συνυπολογισμού στα επόμενα πειράματα.

Εφαρμογή χοίρειο trypsin

Χοίρειο trypsin είναι ένα είδος trypsin, το οποίο μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως πρόσθετη ουσία για την απομάκρυνση των προσκολλημένων κυττάρων επιφάνειας, την παραγωγή των εμβολίων ιών της γρίπης, την ινσουλίνη και άλλες πρωτεΐνες, τη γρήγορη υδρόλυση των πρωτεϊνών, και την προεπεξεργασία των ζωικών κυττάρων και των ιστών. Υπάρχει μια μεγάλη ζήτηση για trypsin με την υψηλή αγνότητα και την ισχυρή δραστηριότητα. Αυτή τη στιγμή, μια διαδικασία προετοιμασιών ανασυνδυαζόμενος χοίρειος trypsinogen έχει καθιερωθεί, και αποκτηθε'ν ανασυνδυαζόμενο χοίρειο trypsin αναπτύσσει την καλή ενζυμική δραστηριότητα και δεν περιέχει άλλη ζωική ρύπανση πηγής, η οποία παρέχει μια ορισμένη πειραματική βάση για τη βιομηχανοποιημένες έρευνα και την παραγωγή.

Χαρακτηριστικά χοίρειο trypsin

Χοίρειο trypsin είναι ασταθές στη φύση και επιρρεπές σε autolysis. Κατά κατασκευή ενός ανασυνδυαζόμενου χοίρειου trypsinogen συστήματος έκφρασης, αυτό το autolysis τη χαρακτηριστικό γνώρισμα το καθιστά δύσκολο για το ευκαριωτικό σύστημα έκφρασης να ληφθεί πλήρης trypsinogen, και το ενεργοποιημένο προϊόν έχει επιπτώσεις στον οικοδεσπότη. Τα κύτταρα μπορούν επίσης να είναι τοξικά, να θεωρήσουν έτσι ένα prokaryotic σύστημα έκφρασης. Επιπλέον, τα autolysis χαρακτηριστικά απαιτούν ότι οι όροι ενεργοποίησης χοίρειος trypsinogen πρέπει επίσης να ελεγχθούν αυστηρά.

Μέθοδος προετοιμασιών χοίρειο trypsin

Στην παραδοσιακή μέθοδο προετοιμασιών, υπάρχουν πολλά βήματα χωρισμού και καθαρισμού και μακροπρόθεσμοι, οι οποίοι είναι εύκολο να προκαλεσθούν τη ζημία στην πρωτεΐνη και να προκαλέσουν την αδρανοποίηση. Με συνέπεια τη χαμηλή παραγωγή. Επομένως, η προετοιμασία και η παραγωγή χοίρειο trypsin έχουν μετατοπιστεί βαθμιαία από την εξαγωγή από το ζωικό πάγκρεας στην ανασυνδυαζόμενη παραγωγή έκφρασης. Η παραγωγή trypsin με την κατασκευή ενός ανασυνδυαζόμενου χοίρειου trypsinogen-παραγόμενου συστήματος έκφρασης Escherichia coli μπορεί επίσης να αποφύγει τον κίνδυνο σχετικής μόλυνσης παθογόνων και τον κίνδυνο τους άγνωστους ιούς λόγω της ζωικής προέλευσης του χορηγού.