CAS 1135-40-6 CAPS Cyclohexylamine Propanesulfonic Acid για πειράματα αποθήκευσης

Σύντομη εισαγωγή

Από την άποψη της μοριακής δομής, το CAPS είναι ένα κυκλοεξάνιο N- υποκατασταθέν θειικό οξύ με μοριακό βάρος 221,32 και αμφοτρικό.Είναι ένα πολύ καλό βιολογικό απο tampon με pH 9.7-11.1Χρησιμοποιείται συνήθως για πειράματα WB. Ταμείο για πρωτεΐνη PVDF μεμβράνη μεταφοράς ή νιτροκυτταρίνη NC μεμβράνη μεταφοράς.

Ταμείο ασφαλείας CAPS

Το WB σημαίνει "Western blot protein immunoblotting experiment". Η αρχή είναι να χρωματίζουν κύτταρα ή βιολογικά δείγματα που έχουν υποβληθεί σε ηλεκτροφορέση με συγκεκριμένα αντισώματα.και να αποκτήσουν την έκφραση συγκεκριμένων πρωτεϊνών στα αναλυθέντα κύτταρα ή ιστούς αναλύοντας τη θέση και το βάθος της χρωστικήςΟι πειραματικές σημειώσεις είναι οι εξής:

1. Ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE: παρόμοια με τη μέθοδο υβριδισμού νουκλεϊκών οξέων, εκτός από το γεγονός ότι η ανιχνευόμενη είναι η πρωτεΐνη, ο ανιχνευτής είναι το αντισώμα και το έγχρωμο δευτερογενές αντισώμα επισημαίνεται.Σε γενικές γραμμέςΤο σύστημα θωρακισμού Τριγλυκερίνης ή Τρι- Τρισινής χρησιμοποιείται για πρωτεΐνες χαμηλού μοριακού βάρους, ενώ το σύστημα θωρακισμού CAPS είναι καλύτερο για πρωτεΐνες υψηλού μοριακού βάρους.Η γλυκίνη στο μπουφερ θα επηρεάσει την αλληλουχία.Η συγκέντρωση της μεθανόλης στο buffer ηλεκτροτυπώσεως CAPS είναι 0-20%.ένα απόθεμα με υψηλή συγκέντρωση μεθανόλης έχει καλή επίδραση μεταφοράς σε πρωτεΐνες χαμηλού μοριακού βάρους, ενώ ένα μπουφέρι με χαμηλή συγκέντρωση μεθανόλης ή ακόμη και χωρίς μεθανόλη είναι καλό για πρωτεΐνες υψηλού μοριακού βάρους.

2Όταν η μεμβράνη PVDF υποστεί επεξεργασία, βυθίζεται σε μεθανόλη για λίγα δευτερόλεπτα και στη συνέχεια τοποθετείται σε buffer ηλεκτροτυπίας CAPS.Εάν η μεμβράνη PVDF στεγνώσειΤο τζελ ηλεκτροφορέσης πρέπει επίσης να βουτήξει σε tampon CAPS για 5-10 λεπτά.

3Οι συνθήκες μεταφοράς είναι συνήθως σταθερή τάση 50V, ένταση ρεύματος 100-170mA και μεταφορά ηλεκτροαποτυπώσεων σε θερμοκρασία δωματίου..Για τις πρωτεΐνες με υψηλότερο μοριακό βάρος, πρέπει να δίνεται προσοχή στην παράταση του χρόνου μεταφοράς.

Συσκευασία προϊόντος

4Πριν από τη βαφή, η μεμβράνη PVDF πρέπει να αφαιρεθεί και να ξεπλυθεί με αποιονισμένο νερό, να βυθιστεί σε μεθανόλη, στη συνέχεια να βαφτεί με 0,1% Coomassie λαμπερό μπλε για 30-50 δευτερόλεπτα, να αποχρωματιστεί με 50% μεθανόλη,πλένονται με αποιονισμένο νερό και στεγνώνουν.

Το παραπάνω εισάγει κάποια ζητήματα που χρειάζονται προσοχή στο πείραμα αποτύπωσης πρωτεϊνών.Παρακαλούμε να φοράτε εργαστηριακά ρούχα και να φοράτε γάντια μιας χρήσης για τη λειτουργίαΗ συσκευή ηλεκτροεκτύπωσης CAPS συνιστάται να παράγεται από: ΝτεσένγκΗ διαμόρφωση υψηλής ποιότητας κυκλοεξυλαμινικού προπανησουλφονικού οξέος.