Όξινος απομονωτής 1,4-Piperazinediethanesulfonic μεθόδου προετοιμασιών

Μέθοδος υψηλής απόδοσης για την παρασκευή του αποθέματος ασφαλείας του 1,4-piperazinediethanesulfonic acid

Το διαιθανσουλφονικό οξύ πιπεραζίνης PIPES έχει διάφορα συστήματα ασφαλείας,μεταξύ των οποίων το διάλυμα tampon Transformation Buffer (που ονομάζεται επίσης διάλυμα TB) μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την προετοιμασία πολύ αποδοτικών αρμόδιων κυττάρων.

Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellΜερικά βακτήρια είναι φυσικά ικανά, όπως το Bacillus subtilis, και μερικά είναι τεχνητά ικανά, όπως το Escherichia coli.Η επεξεργασία των κυττάρων υποδοχής με μια ειδική μέθοδο μπορεί να αλλάξει την διαπερατότητα της κυτταρικής μεμβράνης, καθιστώντας το ένα ικανό κύτταρο που επιτρέπει στα μόρια φορέα με ξένο DNA να περάσουν.

Αρμόδια πρώτη ύλη για το διάλυμα φυματίωσης - σκόνη PIPES

Προετοιμασία μετασχηματισμού:

Η μετατροπή των αρμόδιων βακτηριακών κυττάρων χρησιμοποιεί τη μέθοδο του χλωριούχου ασβεστίου.37 βαθμοί τη νύχτα μέχρι να μεγαλώσει μια αποικία.. Επιλέξτε μια αποικία με διάμετρο 1-3 mm για να εμβολιάσετε το μέσο SOB σε φιάλη Erlenmeyer 250 ml/3L ή φιάλη Erlenmeyer 80 ml/1L. Εμβολιάστε σε θερμοκρασία 18 βαθμών με 150-250RPM για 19-50h.Σταματήστε την καλλιέργεια όταν η OD600 είναι περίπου 0..4-0.8, ψύξη σε νερό με πάγο 4 βαθμών για 10 λεπτά, φυγοκέντρωση με 300 στροφές ανά λεπτό για 15 λεπτά, ανάκτηση των βακτηρίων μετά την αφαίρεση του υπερυψωμένου, αναστολή σε 1/3 όγκου παγωμένου διαλύματος φυματίωσης,και αποστραγγίζουμε ξανά για 10 λεπτά για να ανακτήσουμε τα βακτήρια. Αναστέλλεται με 1/12,5 όγκο TB, προστίθεται DMSO με τελική συγκέντρωση 7%, και κατόπιν ψύχεται για 10 λεπτά σε αλικουατέτα 0,1-1 ml και φυλάσσεται απευθείας σε υγρό άζωτο ή -80°C.

Στο διάλυμα φυματίωσης αιωρούμενου Escherichia coli, τα κύρια συστατικά περιλαμβάνουν τα buffer PIPES και το χλωριούχο ασβέστιο για τη μετατροπή των κυττάρων σε αρμόδια.Θα πρέπει να σημειωθεί ότι η μέθοδος αυτή είναι κατάλληλη γιαΗ αποτελεσματικότητα μετασχηματισμού μπορεί να μειωθεί μετά την κρυοσυντήρηση.η βέλτιστη ΔΟ600 των διαφόρων βακτηριακών στελεχών είναι επίσης διαφορετική, και πρέπει να προσαρμόζεται σύμφωνα με διαφορετικά πειράματα.

Υπάρχουν πολλές μέθοδοι για την προετοιμασία αρμόδιων κυττάρων με φυματίωση και η αποτελεσματικότητα των διαφόρων μεθόδων μπορεί να είναι διαφορετική και τα εφαρμοστέα στελέχη ή τύποι κυττάρων μπορεί επίσης να είναι διαφορετικά.Το PIPES που παράγεται από την Desheng είναι ένα αντιδραστήρα σκόνης, και τα κατάλληλα λύματα φυματίωσης μπορούν να παρασκευαστούν ανάλογα με τις διαφορετικές ανάγκες.

Η Desheng Biochemical είναι ένας κατασκευαστής που ειδικεύεται στην παραγωγή βιολογικών αποστάτων στην Κίνα.4- ((2-υδροξυαιθυλο)-1-πιπεραζινετινήσυλονικό οξύ, 3-Cyclohexylaminopropanesulfonic Acid, κλπ, όλα με καθαρότητα πάνω από 99%, αν χρειαστείς Οι επιχειρηματίες φίλοι σας μπορούν να επικοινωνήσουν μαζί μας!