Γιατί το HEPES Buffer 7365-45-9 χρησιμοποιείται στην ανίχνευση της λακτατικής αφυδρογονάσης

Η λακτατική αφυδρογονάση (LDH), ως ένα από τα βασικά ένζυμα στο ενδοκυτταρικό μονοπάτι γλυκόλυσης, υφίσταται αλλαγές στη δραστηριότητά της σε διάφορες παθολογικές συνθήκες.Η ακριβής μέτρηση της δραστηριότητας της LDH έχει μεγάλη σημασία όχι μόνο για τη βασική επιστημονική έρευναΗ επιλογή του κατάλληλου αποθέματος ασφαλείας είναι ένας από τους βασικούς παράγοντες για τη διασφάλιση της ακρίβειας των αποτελεσμάτων των δοκιμών κατά τη διάρκεια αυτής της διαδικασίας.

4-υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθανουσουλφονικό οξύ (Ταμείο ασφαλείας HEPES), ως ευρέως χρησιμοποιούμενο βιολογικό απόθεμα ασφαλείας, γίνεται σταδιακά το βασικό συστατικό των συστημάτων ανίχνευσης της λακτατικής αφυδρογονάσης.Αυτό το άρθρο θα αναλύσει λεπτομερώς από πολλαπλές προοπτικές γιατί το HEPES buffer χρησιμοποιείται στην ανίχνευση της λακτατικής αφυδρογονάσης.

Ταμείο ασφαλείας HEPES

1, Βασικά χαρακτηριστικά του HEPES

Το HEPES είναι ένα ζβιτεριονικό απόθεμα ασφαλείας που περιέχει αμινο- και καρβοξυλικές ομάδες, με μοριακό τύπο C8H18N2O4S.και άοσμος στερεός με καλή υδατοδιαλυτότητα και χημική σταθερότητα.

Το εύρος αποθήκευσης του HEPES είναι μεταξύ pH 6,8 και 8.2, και για την ανίχνευση της LDH, το καταλυτικό περιβάλλον της βρίσκεται συνήθως εντός αυτής της κλίμακας pH.Το HEPES μπορεί να διατηρήσει αποτελεσματικά τη σταθερότητα των συνθηκών αντίδρασης και να εξασφαλίσει την ακρίβεια της μέτρησης της δραστηριότητας των ενζύμωνΕπιπλέον, η ικανότητα αποθήκευσης του HEPES δεν επηρεάζεται από τη συγκέντρωση CO2, η οποία είναι ιδιαίτερα σημαντική για την κυτταρική καλλιέργεια και τις βιοχημικές αντιδράσεις σε ανοιχτό περιβάλλον.

2, Εφαρμογή του HEPES στην ανίχνευση LDH

Το HEPES, ως ένα από τα βασικά συστατικά του κιτ ανίχνευσης της λακτατικής αφυδρογονάσης, διαδραματίζει πολλαπλούς ρόλους.με αντιδραστήρα I που περιέχει βιολογικό απο tampon HEPES, σύνθετο ιόντων μετάλλων, υπόστρωμα αντίδρασης LDH, επιφανειακό δραστικό, ενεργοποιητή ενζύμου LDH, συντηρητικό και νερό.συντηρητικόΜε την προσθήκη διαφόρων λειτουργικών συστατικών ξεχωριστά, οι συνθήκες αντίδρασης μπορούν να ελεγχθούν καλύτερα και να μειωθεί η παρεμβολή που προκαλείται από τη θολότητα του ίδιου του δείγματος.

3, Βελτίωση της ακρίβειας και της αποτελεσματικότητας της ανίχνευσης

Καλή σταθερότητα: Το buffering effect που παρέχεται από το HEPES εξασφαλίζει τη σταθερότητα του pH καθ' όλη τη διάρκεια της διαδικασίας ανίχνευσης, η οποία είναι κρίσιμη για τη μέτρηση της δραστηριότητας των ενζύμων.

Υψηλή ακρίβεια: Με την βελτιστοποίηση του τύπου και την εφαρμογή αυστηρών μέτρων ελέγχου της ποιότητας, εξασφαλίζονται σταθερά αποτελέσματα για κάθε δοκιμή.

Ευρύ φάσμα γραμμικών δοκιμών: ικανό να καλύπτει ένα ευρύ φάσμα επιπέδων δραστηριότητας LDH, να προσαρμόζεται σε διαφορετικούς τύπους δειγμάτων και να ανταποκρίνεται σε διαφορετικές κλινικές ανάγκες.

Σημαντική ικανότητα κατά των παρεμβολών: αντιστέκεται αποτελεσματικά στην επίδραση εξωτερικών παραγόντων, όπως αλλαγές θερμοκρασίας ή ακαθαρσίες δείγματος, εξασφαλίζοντας την αυθεντικότητα των δεδομένων.

Δεν χρειάζεται προαραίωση: απλοποιεί τα πειραματικά βήματα, συντομεύει τον χρόνο ανίχνευσης, ειδικά κατάλληλο για πολυσύχναστα κλινικά περιβάλλοντα.

4, Αρχή αντίδρασης και μέτρηση

Η διαδικασία της καταλύσιμης μείωσης του πυρουβικού οξέος σε L-λακτικό οξύ από την LDH είναι αναστρέψιμη αντίδραση και όταν η συγκέντρωση του γαλακτικού οξέος είναι υψηλή, προωθεί την αντίστροφη αντίδραση, δηλαδήΣύνθεση πυρουβικού οξέος από γαλακτικό οξύ. Υπό κατάλληλες συνθήκες pH που διατηρούνται στο tampon HEPES, το L-λακτικό οξύ αντιδρά με το NAD+ για να παράγει πυρουβικό οξύ και NADH. Το NADH παρουσιάζει χαρακτηριστική απορρόφηση σε μήκος κύματος 340nm,που σημαίνει ότι η δραστηριότητα της LDH μπορεί να ποσοτικοποιηθεί με την παρακολούθηση των αλλαγών στην απορρόφηση.

Συσκευασία προϊόντος

Η Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. ειδικεύεται στην παραγωγή υλικών υψηλής ποιότητας.βιολογικά αποθηκευτικά παράγοντεςΗ επαγγελματική τεχνική ομάδα μας εξασφαλίζει την ποιότητα του προϊόντος και μπορεί επίσης να παρέχει προσαρμοσμένες λύσεις σε έγκαιρα προβλήματα μετά την πώληση.Κάντε κλικ στην επίσημη ιστοσελίδα για περισσότερες λεπτομέρειες ή επικοινωνήστε μαζί μου!