Εφαρμογή του βιολογικού αποθέματος ασφαλείας CAPS 1135-40-6 στο PCR Diagnostic Kit

Οι χημικές ιδιότητες του CAPS: το «χρυσό σημείο ισορροπίας» για την ασθενή βασική ρύθμιση

Το CAPS είναι ένα αμφιϊοντικό ρυθμιστικό διάλυμα με τιμή pKa 10,4 (25 ℃), που παρουσιάζει εξαιρετική ρυθμιστική ικανότητα σε αλκαλικά περιβάλλοντα. Σε σύγκριση με παραδοσιακούς ρυθμιστικούς παράγοντες όπως η Tris ή η HEPES, το ρυθμιστικό εύρος του CAPS (pH 9,7-11,0) είναι περισσότερο σύμφωνο με τις απαιτήσεις ορισμένων ειδικών συστημάτων σε αντιδράσεις PCR. Η ομάδα κυκλοεξυλαμίνης στη μοριακή δομή του ρυθμιστικού διαλύματος CAPS του προσδίδει καλή υδροφοβικότητα, ενώ η ομάδα σουλφονικού οξέος εξασφαλίζει διαλυτότητα στο νερό. Αυτό το χαρακτηριστικό «εύκαμπτο και άκαμπτο» επιτρέπει στο CAPS να διατηρεί τη σταθερότητα του pH του διαλύματος, μειώνοντας παράλληλα τις μη ειδικές παρεμβολές στη δραστικότητα των ενζύμων, παρέχοντας ένα ήπιο και σταθερό περιβάλλον για αντιδράσεις PCR.

Σκόνη CAPS

Ο βασικός ρόλος του CAPS στην PCR

1. Η σταθερότητα του pH εξασφαλίζει τη δραστικότητα των ενζύμων: Το CAPS ρυθμίζει με ακρίβεια την τιμή του pH του συστήματος αντίδρασης για να αποφευχθεί η μετατόπιση του pH που προκαλείται από την εξάτμιση του διαλύματος ή τη χημική αποδόμηση κατά τη διάρκεια των βημάτων αποδιάταξης υψηλής θερμοκρασίας, διασφαλίζοντας ότι το ένζυμο καταλύει τη σύνθεση DNA υπό βέλτιστες συνθήκες και βελτιώνει σημαντικά την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης.

2. Αναστολή της μη ειδικής σύνδεσης και ενίσχυση της ειδικότητας: Το CAPS διατηρεί σταθερή ιοντική ισχύ, μειώνει την πιθανότητα μη αντιστοίχισης εκκινητή-προτύπου και η μοναδική χημική του δομή μπορεί να μειώσει την επιφανειακή τάση του διαλύματος, να βελτιστοποιήσει τον σχηματισμό σταγονιδίων και να μειώσει περαιτέρω τον θόρυβο υποβάθρου σε ανίχνευση υψηλής ακρίβειας όπως η PCR.

3. Συμβατό με πολύπλοκα δείγματα και ενισχυμένη ικανότητα κατά των παρεμβολών: Τα κλινικά δείγματα (όπως αίμα και σάλιο) συχνά περιέχουν αναστολείς που μπορεί να παρεμβαίνουν στις αντιδράσεις PCR. Το ρυθμιστικό σύστημα του CAPS μπορεί να εξουδετερώσει την επίδραση φόρτισης ορισμένων αναστολέων, σε συνδυασμό με την επίδραση αποδιάταξης του αλκαλικού του περιβάλλοντος σε ορισμένους αναστολείς πρωτεϊνών, βελτιώνοντας σημαντικά την προσαρμοστικότητα του κιτ σε πολύπλοκα δείγματα.

Πρακτικές περιπτώσεις εφαρμογής του CAPS: εκτεταμένη επικύρωση από εργαστηριακές έως κλινικές ρυθμίσεις

Στην ανίχνευση νουκλεϊκών οξέων του COVID-19, το CAPS έχει συμπεριληφθεί στη φόρμουλα του κιτ PCR από αρκετούς έγκυρους οργανισμούς. Για παράδειγμα, ένα κιτ αντιδραστηρίων ορισμένης μάρκας που χρησιμοποιεί το ρυθμιστικό σύστημα CAPS έδειξε υψηλότερη ευαισθησία σε συγκριτικές δοκιμές και μπόρεσε να διατηρήσει τη σταθερότητα του pH υπό συνθήκες υψηλής θερμοκρασίας, μειώνοντας τα ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα. Επιπλέον, σε σενάρια όπως η ανίχνευση μετάλλαξης γενετικών ασθενειών και η ανάλυση δεικτών όγκων, το ασθενές αλκαλικό περιβάλλον του CAPS μπορεί να βελτιστοποιήσει την αποτελεσματικότητα σύνδεσης των ανιχνευτών, να ενισχύσει την ένταση του σήματος φθορισμού και να παρέχει υποστήριξη για την ανίχνευση στόχων χαμηλής αφθονίας.

Συσκευασία προϊόντος